[发明专利]一种铁镍磁性微球、其制备方法及在蛋白质纯化中的应用

权利要求书

1.一种铁镍磁性微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将可溶性铁盐、可溶性镍盐置于乙二醇中，加入醋酸钠，在80℃下于油浴锅中，搅拌30min；

b.加入乙醇胺，N₂保护下于180-210℃搅拌反应6h，反应结束后，停止通N₂，自然冷却至20-25℃；

c.将步骤b中得到的产物用去离子水洗涤5-7次，每次洗涤5分钟，制得水合磁性微球；

d.将水合磁性微球依次采用体积百分比为20％、40％、60％和80％的乙醇水溶液各清洗2次，再用无水乙醇洗涤5次，将洗涤后产物放入敞口容器中，室温干燥至乙醇完全挥发，于80℃下真空干燥12h，得铁镍磁性微球。

2.根据权利要求1所述的一种铁镍磁性微球的制备方法，其特征在于，所述步骤a可溶性铁盐为硝酸铁、氯化铁、硫酸铁或三者水合物中任意一种。

3.根据权利要求1所述的一种铁镍磁性微球的制备方法，其特征在于，所述步骤a可溶性镍盐为硝酸镍、氯化镍、硫酸镍或三者水合物中任意一种。

4.根据权利要求1所述的一种铁镍磁性微球的制备方法，其特征在于，原料的摩尔比为可溶性铁盐：可溶性镍盐：醋酸钠：乙二醇：乙醇胺＝1：0.5～2：1.3～2.6：100～250：80～110。

5.根据权利要求4所述的一种铁镍磁性微球的制备方法，其特征在于，原料的摩尔比为可溶性铁盐：可溶性镍盐：醋酸钠：乙二醇：乙醇胺＝1：1：1.46：235：100。

6.一种铁镍磁性微球是按照权利要求1所述方法制备而得，其特征在于，铁镍磁性微球为NiFe₂O₄。

7.按权利要求1所述的方法制得的铁镍磁性微球在蛋白质纯化中的应用，其特征在于，铁镍磁性微球制备后无需额外修饰可直接应用于带组氨酸标签的目标蛋白的分离纯化。

8.根据权利要求7所述的铁镍磁性微球在蛋白质纯化中的应用，其特征在于，包括以下步骤：将磁性微球与粗蛋白提取液混合，通过离心或磁铁吸附，分离出带有目标蛋白的磁性微球，将带有目标蛋白的磁性微球用结合缓冲液清洗后，再用含有高浓度咪唑的洗脱缓冲液将带有组氨酸标签的目标蛋白从磁性微球上洗脱下来。