[发明专利]一种基于钯三脚架构建的肌红蛋白生物传感器的制备方法及应用

权利要求书

1.一种基于钯三脚架构建的肌红蛋白生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）依次用1.0、0.3、0.05 μm的氧化铝粉末对玻碳电极进行抛光，分别在超纯水和乙醇中超声清洗，氮气吹干；

（2）在电极表面滴加6 μL浓度为1 ~ 2 mg/mL的钯三脚架水溶液，干燥；

（3）继续将6 μL浓度为8 ~ 12 μg/mL的肌红蛋白检测抗体溶液滴加到修饰电极表面，于4℃冰箱中孵化1 h，清洗干净；

（4）用3 μL浓度为5 ~ 15 mg/mL的牛血清白蛋白溶液封闭非特异性活性位点，于4℃冰箱中孵化1 h，清洗干净；

（5）将6 μL浓度为0.000003 ~ 3 ng/mL的一系列不同浓度的肌红蛋白抗原用于和检测抗体的特异性识别，室温下孵化1 h，清洗干净，于4℃冰箱中储存备用。

2.根据权利要求1所述的制备方法制备的一种基于钯三脚架构建的肌红蛋白生物传感器的制备方法，所述钯三脚架的制备，其特征在于，包括以下步骤：

在50 ~ 100 mL超纯水中溶解0.0355 g氯化钯和0.876 g氯化钠，得到浓度为2 ~ 4 mmol/L的氯化钯溶液，将0.0546 ~ 0.1092 g十六烷基三甲基溴化铵溶解在装有9.475 ~ 18.95 mL超纯水的试剂瓶中，随后，向其中加入1.25 ~ 2.5 mL制备的氯化钯溶液和25 ~ 50 μL浓度为4 mmol/L乙酸铜，震荡5 s，将该试剂瓶至于30℃的水浴中，然后加入250 ~ 500 μL浓度为0.1 mol/L的抗坏血酸，继续在水浴中静置3 h，最后溶液变为深灰色，离心洗涤后，得到钯三脚架。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于钯三脚架构建的肌红蛋白生物传感器，其特征在于，用于肌红蛋白抗原的检测，检测步骤如下：

（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的免疫传感器为工作电极，在10 mL的pH值为6.8的磷酸盐缓冲溶液中进行测试；

（2）选择计时电流法对肌红蛋白抗原进行检测，将输入电压设置为-0.4 V，取样间隔设置为0.1 s，运行时间设置为400 s；

（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50 s向磷酸盐缓冲溶液中注入10 μL浓度为5 mol/L的双氧水溶液，然后记录电流随时间的变化，绘制工作曲线；

（4）将待测样品溶液代替肌红蛋白抗原标准溶液进行检测。

4.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于钯三脚架构建的肌红蛋白生物传感器，其特征在于，所述肌红蛋白抗原是一种是心肌梗死的标志物。