[发明专利]白蜡树子抗肿瘤提取物及其组合物的医药用途和制备方法

说明书

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种维吾尔药白蜡树子抗肿瘤提取物及其组合物的制备方法以及它在肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、乳腺癌、宫颈癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗上的用途。

背景技术

本品为木犀科植物白蜡树，学名 Fraxinus chinensis Roxb ，苦枥白蜡树Fraxinus rhynchophylla Hance及其同属多种植物干燥的种子。我国南北名地都有分布。白腊树是白腊虫的最适寄主。历史上西昌等地建有许多白蜡树园放养白蜡虫，以取白蜡，过去西昌白蜡虫交易的“虫会”闻名全国。另，白蜡树木材坚韧，供制家俱、农具、车辆、胶合板等；枝条可编筐；树皮称“春皮”，中医学上用为清热药。

白蜡树子功效生干生热，填精壮阳，补肾固精，止咳平喘，补心安神，利尿消石，驱寒助孕。现在药理学研究证明白蜡树子具有肝癌、肺癌、胃癌、肠癌、胰腺癌等恶性肿瘤的预防及治疗。

本发明在深入地研究白蜡树子的抗癌活性时意外地发现，白蜡树子除了具有诱导白血病细胞凋亡的功效外，亦具有很好的乳腺癌、宫颈癌、肝癌、肺癌、胃癌、结肠癌、胰腺癌、脑胶质瘤等恶性肿瘤的预防及治疗作用，该活性提取物及其组合物有望应用到多种癌症的预防和治疗上。

发明内容

本发明所解决的技术问题是提供一种白蜡树子提取物。

本发明还提供了以白蜡树子提取物为主要活性成分的组合物。

本发明同时提供了白蜡树子提取物及其组合物的制备和应用。

本发明是通过如下技术方案实现的：

维吾尔药白蜡树子经甲醇超声提取，提取液浓缩后，用硅胶（SiO₂）柱分离，上样后的硅胶柱，用石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱（石油醚：丙酮，比例见表1），各石油醚：丙酮比例混合溶剂洗脱液，浓缩，干燥后，利用体外抗肿瘤活性筛选体系测试其抗肿瘤活性，意外地发现先用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:17，体积比）洗脱，继用石油醚：丙酮混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱，洗脱得到的石油醚-乙酸乙酯混合溶剂（石油醚：丙酮，100:30，体积比）洗脱液经回收有机溶剂，干燥，即为抗肿瘤活性提取物，而其他比例的洗脱组分，不具有抗肿瘤活性。特别地，优选为先用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱25倍柱体积，继用石油醚-丙酮混合溶剂（石油醚-丙酮，100:30，体积比）洗脱30倍柱体积，洗脱液干燥即为本发明抗肿瘤活性的提取物。抗肿瘤活性的提取物可以通过以上方法得到富集，从而与其他杂质类成分分离开。该抗肿瘤活性提取物从未见文献报道，其薄层谱色谱（TLC）分析表征如图1，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1）显色方法：香草醛-硫酸显色。

具体，发现过程如下：

1、白蜡树子经甲醇超声提取物的制备

取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 ml甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0058A 763.8 mg，留样34.4 mg，剩余729.4 mg，石油醚-丙酮系统洗脱。

2、石油醚：丙酮混合溶剂梯度洗脱方法和结果

取维吾尔药白蜡树子20 g，经100 ml甲醇超声提取15 min，提取液浓缩后，得提取物SN0058A  763.8 mg，留样34.4 mg，剩余729.4 mg。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15 ml。上硅胶柱色谱，拌样硅胶1 g，空白硅胶10 g，玻璃柱内径1.5 cm，石油醚：丙酮系统梯度洗脱（条件见表1），柱体积12.5 ml，每个梯度洗脱100 ml，得到，各个浓度提取洗脱液的洗脱物，回收溶剂，即得，石油醚：丙酮梯度洗脱提取物，TLC分析结果见图2，TLC分析条件：GF254硅胶板，展开系统：石油醚：乙酸乙酯：丙酮（6:1:1），显色方法：香草醛-硫酸显色。

3、抗肿瘤活性筛选方法和结果

1）实验条件

a) 细胞株信息

人子宫颈癌细胞株Hela购于中国典型培养物保藏中心细胞库。

b) 药品及试剂

样品无菌条件下，DMSO 溶解配置成母液浓度为100mg/mL，使用时用RPMI-1640 培养液稀释至所需浓度（DMSO≤1 ‰）。