[发明专利]一种含有海藻酸钠的药用组合物及其制备方法

权利要求书

1.一种用于骨软骨组织修复含有海藻酸钠的药用组合物，其特征在于，该组合物的活性成分为：细胞浓度不低于0.5×10⁷/ml的骨形态发生蛋白-4转染的脂肪来源干细胞，及含量为1～2％(w/v)的海藻酸钠和0.3～0.5％(w/v)的氯化钙。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该合物还包括以下含量的辅料：0.5～0.7％(w/v)的氯化钠，和0.3～0.5％(w/v)的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。

3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述海藻酸钠的含量为1.4～1.8％。

4.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，所述骨形态发生蛋白-4转染的脂肪来源干细胞的浓度为(1～2)×10⁷/ml。

5.如权利要求1-4任一条所述的组合物，其特征在于，该组合物由细胞浓度为(1～1.5)×10⁷/ml的骨形态发生蛋白-4转染的脂肪来源干细胞，含量为1.6～1.7％的海藻酸钠、0.35～0.45％的氯化钙、0.5～0.7％的氯化钠、0.3～0.5％的4-羟乙基哌嗪乙磺酸和适量pH调节剂制成。

6.权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

⑴提取并制备骨形态发生蛋白-4转染的脂肪来源干细胞；

⑵制备海藻酸钠溶液；

⑶制备氯化钙溶液；

⑷临用前将步骤⑴得到的细胞悬浮于步骤⑵得到的海藻酸钠溶液中；

⑸将步骤⑷和步骤⑶所得物按体积比2:1的比例混合均匀，即得本发明组合物。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤⑴包括：

a.脂肪组织干细胞的提取、分离与培养，取3～10代细胞；

b.骨形态发生蛋白-4重组腺病毒；

c.骨形态发生蛋白-4重组腺病毒体外转染脂肪来源干细胞；

d.检测转染效果，取转染率大于70％的细胞于-65～-75℃环境下储存，备用。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤⑵具体为：将氯化钠、4-羟乙基哌嗪乙磺酸溶于70～95％的去离子水中，加热到50～80℃，保温，加入海藻酸钠，搅拌，得均一溶液，放置室温，加pH调节剂调节pH值至7.35～7.45，用去离子水定容，备用。

9.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤⑶具体为：取氯化钙及4-羟乙基哌嗪乙磺酸，加50～95％去离子水制成溶液，调节pH值至7.35～7.45，去离子水定容，0.22μm滤膜过滤，备用。

10.权利要求1所述的组合物在制备骨软骨组织修复药物和/或医用材料中的应用。