[发明专利]一种酶法乙醇测定试剂盒稳定剂在审
申请号: | 201510056805.2 | 申请日: | 2015-01-28 |
公开(公告)号: | CN104697992A | 公开(公告)日: | 2015-06-10 |
发明(设计)人: | 王珂;王金堂;姚旭飞 | 申请(专利权)人: | 公安海警学院 |
主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/31 |
代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
地址: | 315801 浙江省宁*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 乙醇 测定 试剂盒 稳定剂 | ||
技术领域
本发明涉及检验技术领域,具体涉及一种酶法乙醇测定试剂盒稳定剂。
背景技术
近年来,酒后引起的刑事案件和交通事故案不断上升,2011年5月1日《中华人民共和国刑法修正案(八)》正式实施,醉酒驾驶作为危险驾驶罪被追究驾驶人刑事责任,有关酒驾的话题再次成为人们关注的焦点。
目前,许多国家都制定了血液中乙醇浓度与交通事故责任认定的关系,建立了多种能够检测血液中乙醇含量的方法,如GM/MS法、酶终点比色法、均相酶免疫测定法和呼出气乙醇分析法等。GM/MS法被认为是乙醇测定的参考方法,但该法仪器昂贵,手续复杂,不便推广。而酶法自动分析法具有特异性高,操作简单快捷、准确安全、可自动化分析的优点,因而被广泛应用,其原理为:乙醇被乙醇脱氢酶氧化生成乙醛的同时伴有辅酶I生成还原型辅酶I,产生的还原型辅酶I可直接在340nm处比色检测,利用还原型辅酶I的酶法同正在使用中的许多其他酶法相似,能在实验室现有的仪器上完成。但酶分析法中使用的反应促进剂盐酸氨基脲暴露在空气中会不断变化,影响试剂的检测准确度,因此,采用该法测定乙醇时,试剂每次使用完毕后必须及时取出盖上盖子加以保存,下一份样本来时又必须打开盖子,放好试剂后再加以检测,给实际应用带来了很大不便,无法满足临床实际检测需要。
发明内容
本发明针对现有技术的不足,提供一种酶法乙醇测定试剂盒稳定剂,可使酶法乙醇测定试剂开瓶稳定性好,能满足临床检验要求。
本发明提供了一种酶法乙醇测定试剂盒稳定剂,该稳定剂包含肌醇烟酸酯和二甲基亚砜,其中所述的肌醇烟酸酯浓度为50~100g/L,所述的二甲基亚砜浓度为200-500ml/L。
本发明的稳定剂1ml添加到99ml酶法乙醇测定试剂1中,2-8℃暴露在空气中30天后,经检测发现,添加稳定剂的酶法乙醇测定试剂检测低、高值样本的结果偏差均≤2%(见实例数据),未添加稳定剂的酶法乙醇测定试剂检测低、高值样本的结果偏差均>10%(见实例数据)。
本发明的酶法乙醇测定试剂盒稳定剂是按下列方法配制的:
将规定用量的二甲基亚砜加入到容器中,加热至60-65℃,趁热加入规定量的肌醇烟酸酯,待溶解完全后定容至1L。
具体实施方式
以下是本发明的具体实施例,对本发明的技术方案作进一步描述,但本发明并不限于这些实施例。
实施例1
量取200ml二甲基亚砜加入到容器中,加热至60℃,趁热加入50g肌醇烟酸酯,待溶解完全后定容至1L。
取上述稳定剂1ml添加到99ml酶法乙醇测定试剂1中,2-8℃暴露在空气中30天后,对乙醇高低值样本进行检测。
实施例2
量取400ml二甲基亚砜加入到容器中,加热至65℃,趁热加入50g肌醇烟酸酯,待溶解完全后定容至1L。
取上述稳定剂1ml添加到99ml酶法乙醇测定试剂1中,2-8℃暴露在空气中30天后,对乙醇高低值样本进行检测。
实施例3
量取200ml二甲基亚砜加入到容器中,加热至65℃,趁热加入100g肌醇烟酸酯,待溶解完全后定容至1L。
取上述稳定剂1ml添加到99ml酶法乙醇测定试剂1中,2-8℃暴露在空气中30天后,对乙醇高低值样本进行检测。
乙醇样本的测试条件如下:温度:30-37℃;比色杯光径为1.0cm。检测主波长340nm。
乙醇样本的测试方法如下:样品(校准管以校准品做样品)加试剂1混匀,30-37℃孵育3-5min后读取吸光度A0,立即加入试剂2混匀,30-37℃反应5min后,读取吸光度A1,ΔA=A1-A0。其中样本用量2μl,试剂1用量200μl,试剂2用量50μl。
乙醇含量按以下公式进行计算:
下面结合表格对本发明实施例所得的试剂盒稳定剂的性能进行说明。
将实施例1-3添加了本发明稳定剂的酶法乙醇测定试剂和未添加本发明稳定剂的酶法乙醇测定试剂(对照例)2-8℃开瓶30天,对高低值样本进行检测,结果如表1所示:
表1
以上结果表明添加了本发明稳定剂的酶法乙醇测定试剂的开瓶稳定性较未添加本发明稳定剂的酶法乙醇测定试剂好。
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