[发明专利]一种黄独愈伤快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物繁殖技术领域，更具体地说，本发明涉及一种黄独愈伤快速繁殖方法。

背景技术

黄独(Dioscoreaceae)，薯蓣科，薯蓣属植物。一般药用其块茎，主要用于各科甲状腺疾病和多种癌症。生产上主要利用零余子进行无性繁殖，零余子冬季休眠(缪存明)长期无性繁殖致使种性退化，产量.品质连年下降。目前利用愈伤组织成苗可解决黄独种苗紧缺的问题。

目前无论是黄独还是其他植物物种都有利用愈伤组织进行快速繁殖。这种传统的愈伤组织快速繁殖作用原理是：将植物组织消毒以后，进行诱导培养得到愈伤组织或是芽体，再对愈伤组织或是芽体增殖，接着进行生根培养，最后炼苗和移栽。繁殖的不同阶段对培养基有不同的要求，所以需要针对性的规定每个繁殖阶段激素的用法和用量。但是，传统的方法在整个繁殖过程都使用同一种培养基，这些培养基无法满足愈伤组织繁殖的各个阶段的特定性需要，所以无法促进愈伤组织更好更快的成长。

传统的培养基中一般加入了6-BA、IAA、IBA以及NAA，这些物质加入的量不一样会产生不同的效果，且这些物质对于不同的植物产生的效果也不一样。牛肉浸膏属于动物组织培养基的添加物，其为动物组织培养提供养分。把牛肉浸膏应用于植物组织培养基会不会产生良好的效果，目前相关实验还是比较少，特别是将牛肉浸膏应用于黄独愈伤组织培养，目前还是空白。

为了解决这种缺陷，现有技术中公开了一种木鳖子组织培养的快速繁殖方法，其通过在愈伤组织诱导、愈伤组织分化和生根诱导阶段使用不同的培养基和培养条件，以促进愈伤组织的生根率。

但是通过这种方法，是针对木鳖子的繁殖方法，由于植物物种之间具有差异性，这种方法并不适用于黄独，且该技术方案没有使用牛肉浸膏。因此发明一种新的黄独愈伤成苗快速繁殖方法成为一个亟需解决的问题。

发明内容

作为各种广泛且细致的研究和实验的结果，本发明的发明人已经发现，在黄独愈伤组织成苗繁殖的的不同阶段使用加入不同含量的NAA、KT、6-BA和IAA的培养基时，这些加入的化合物有助于提高愈伤组织分化和繁殖的速度，提高生根率，本发明的发明人还发现在每个培养基中加入适量的牛肉浸膏，能够促进愈伤组织的生长，使丛生芽生长的更好。基于这种发现，完成了本发明。

本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。

本发明还有一个目的是在愈伤组织培养、愈伤组织分化获得丛生芽快速繁殖培养、丛生芽壮苗培养和植株生根培养阶段分别使用愈伤诱导培养基、MS繁殖培养基、MS壮苗培养基和MS生根培养基，提高愈伤组织分化速度，提高丛生芽的生长速度，提高生根率。

本发明还有一个目的是在每个培养基中加入适量牛肉浸膏，促进愈伤组织的生长，使丛生芽生长得更好。

本发明还有一个目的是通过生物技术对黄独愈伤组织培养快速繁殖，提高黄独种苗的繁殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种黄独愈伤成苗快速繁殖方法，包括：

使用愈伤诱导培养基进行黄独愈伤组织诱导培养，得到愈伤组织；使用MS繁殖培养基对所得的愈伤组织进行愈伤组织分化培养，得到丛生芽；使用MS壮苗培养基中对所得的丛生芽进行丛生芽壮苗培养，得到健壮植株；使用MS生根培养基对所得的健壮植株进行植株生根培养最终得到完整植株，实现黄独幼苗的炼苗和移栽；

其中，所述愈伤诱导培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的TDZ、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；

MS繁殖培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.1-0.4mg/L的KT、1.0-2.0mg/L的6-BA、0.2-1.0mg/L的IBA、1-5g/L的GA3、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；

MS壮苗培养基中含有：4-6g/L的牛肉浸膏、0.5-1.5mg/L的6-BA、0.1-0.4mg/L的KT、0.2-0.6mg/L的IAA、25-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂；

MS生根培养基中含：4-6g/L的牛肉浸膏、1.0-2.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L的IBA、15-30g/L的蔗糖和4.5-5.0g/L的琼脂。