[发明专利]一种一步薄层层析快速检测生物胺的方法

权利要求书

1.一种快速检测生物胺的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)活化硅胶的制备：对硅胶进行环氧基、氨基、醛基的活化，使硅胶依次接上环氧基、氨基和醛基；(2)活化薄层层析板的制备：活化好的硅胶介质分别进行调浆，铺板和层析板活化制得活化薄层层析板；(3)待测样品中生物胺的薄层层析分析：从待测样品中进行生物胺提取、生物胺提取液净化得到的生物胺净化液，点在活化的薄层层析板上，展开，检测目标生物胺的有无或者定量测定生物胺的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中是使用环氧氯丙烷、双环氧乙烷、苯氧基环氧丙烷、二—(环氧丙基)—邻苯并咪唑酮中的任意一种对硅胶进行环氧基活化；所述环氧基活化的条件：以体积比1:0.5-1:2的0.4-1.2mol/L NaOH溶液与DMSO的混合液作为混合溶剂，震荡，活化温度为30-40℃，活化时间8-14h，环氧氯丙烷、双环氧乙烷、苯氧基环氧丙烷或二—(环氧丙基)—邻苯并咪唑酮的用量为2-10mL/g硅胶。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中是使用氨水、氯胺、乙二胺、双氯胺中的任意一种对硅胶进行氨基活化；所述氨基活化的条件：以质量分数为5％-15％的氨水、氯胺、乙二胺或双氯胺作为活化液系，震荡，活化温度为32-38℃，活化时间8-14h，5％-15％的氨水、氯胺、乙二胺或双氯胺的用量为15-30ml/g硅胶。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中是使用邻苯二甲醛、戊二醛、乙二醛、己二醛中的任意一种对硅胶进行醛基活化；所述醛基活化的条件：以6-12g/L的邻苯二甲醛、戊二醛、乙二醛或己二醛作为活化液系，震荡，活化温度为26-32℃，活化时间15-45min，6-12g/L的邻苯二甲醛、戊二醛、乙二醛或己二醛的用量为5-12ml/g硅胶。

5.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的调浆是每取活化硅胶6-14g，加入2.2-2.8g无水硫酸钙，加入6-12ml去离子水，使固液1:0.5-1:1.5混合调成匀浆；所述步骤(2)中的铺板是将匀浆均匀倾倒在层析板上，然后真空干燥；

6.根据权利要求1-4任一所述的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的层析板活化是将铺板后的薄层层析板放入充满保护气体的装置中进行层析板活化，活化后迅速放入装有变性硅胶干燥剂的装置中备用。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中生物胺净化液按以下方法制备：将食品样品，用水、酸性介质或有机相介质提取样品中生物胺，然后用三氯乙酸稀释，获得生物胺提取液；将生物胺提取液与正己烷混合、萃取脱去脂肪，然后进行液—液萃取，氮气吹干并加入盐酸溶解残留物，获得生物胺净化液。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中生物胺的检测是：采用碘蒸汽或喷雾显色或者不显色，然后于360nm紫外条件下对色谱板进行观察以确定样品中是否存在目标生物胺，或者是采用薄层扫描仪在参比波长360nm，样品波长254nm条件下对色谱板进行扫描，根据每个斑点的吸光值进行定量计算。

9.一种薄层层析板，其特征在于，所述薄层层析板通过以下方法制备：对硅胶进行环氧基、氨基、醛基的活化，使硅胶依次接上环氧基、氨基和醛基，然后将活化好的硅胶介质分别进行调浆，铺板和层析板活化制得活化薄层层析板。

10.权利要求9所述薄层层析板在生物胺快速检测方面的应用。