[发明专利]一种磷脂型多不饱和脂肪酸的酶法制备方法

说明书

本发明公开了一种磷脂型多不饱和脂肪酸的酶法制备方法。该方法采用由游离脂肪酸、多不饱和脂肪酸甘油酯、多不饱和脂肪酸乙酯、磷脂和水组成的反应体系，按质量比，游离脂肪酸：磷脂＝10～30:100；多不饱和脂肪酸甘油酯：磷脂＝50～300:100；多不饱和脂肪酸乙酯：磷脂＝10～30:100；水：磷脂＝1～5:100。制得控制反应温度为30～80℃；反应时间为6～48hr；控制催化剂的加入量为底物质量的1‐5％；反应得到磷脂型多不饱和脂肪酸。该方法具有实施方便，反应效率高的优点。

技术领域

本发明涉及多不饱和脂肪酸，特别是涉及一种具有健康功能的一种磷脂型多不饱和脂肪酸的酶法制备方法。

背景技术

多不饱和脂肪酸(PUFA)指含有两个或两个以上双键且碳链长度为18～22个碳原子的直链脂肪酸。通常分为omega－3和omega－6，在PUFA分子中，距羧基最远端的双键在倒数第3个碳原子上的称为omega‐3脂肪酸，如二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等；在第六个碳原子上的，则称为omega‐6脂肪酸，如花生四烯酸等。PUFA通常都具有显著的生理功能，是人体不可缺少的营养成分。

PUFA产品通常分为乙酯型、甘油三酯型和磷脂型几种。其中甘油三酯型和磷脂型属于天然结构，也就是，在生物体内天然存在的结构，而乙酯型属于非天然结构，之所以存在乙酯型，是因为在多不饱和脂肪酸的分离、浓缩过程，需要PUFA转化为单体，脂肪酸乙酯是一种易于生产加工的结构。

对于不同结构的PUFA产品，人们关心的是哪种结构更好一些。早在1988年，TarryD.等人就比较了乙酯型、甘油酯型和脂肪酸型的鱼油产品，表明脂肪酸型最容易吸收，其次是甘油三酯型，最差是乙酯型，之后的研究也进一步验证了该结论。磷虾油中含有大量磷脂型的PUFA，很多宣传宣称磷虾油具有更高的生物利用度。针对磷脂型和甘油三酯型PUFA的生物利用度，人们进行研究，结果表明，二者的生物利用度大体相当，表明磷脂型PUFA也是一种优秀的结构。另外，磷脂本身就具有健康功能，将磷脂和PUFA结合起来，可以获得二者的复合作用，所以磷脂型PUFA是一种重要的产品形式。天然来源的磷脂型PUFA，一般源于南极磷虾油。由于磷虾油成本高，通过人工的方式合成磷脂型PUFA就成为另一种获取途径。

改变磷脂的脂肪酸构成，一般可以选择酯交换反应或者酸解反应。酯交换反应是选用目的脂肪酸的酯类化合物和磷脂上的脂肪酸进行交换；酸解反应是采用游离脂肪酸和磷脂上的脂肪酸进行交换。由于磷脂具有很高的极性，通常要选择和其极性接近的底物与其反应，反应效率才会更高。研究表明，磷脂和几乎所有的酯化形式的PUFA反应效率都很低。酸解反应时，由于脂肪酸的极性和磷脂更加接近，反应效率得以大幅度提高。PUFA供体的形式对于反应很重要，现有的报道多为游离脂肪酸型；也有采用酯化形式的PUFA，但反应过程中需要添加水，推测实际反应机理PUFA仍然主要是以游离脂肪酸的形式与磷脂发生反应。采用游离脂肪酸作为PUFA的供体，存在以下缺点：第一，脂肪酸型的PUFA的制备通常是采用化学水解的方式，制备成本高，反应产物的后分离更复杂；第二，制备的磷脂型PUFA颜色较深。

发明内容

本发明针对现有技术存在的缺点，提供一种底物容易获得，反应效率高，制备的磷脂型PUFA颜色较浅的磷脂型多不饱和脂肪酸的酶法制备方法。

本发明提供一种新型反应体系，开发了一种适用于酶法高效转化，同时又可以获得高质量产物的反应体系，克服了传统游离脂肪酸型PUFA作为供体制备磷脂型PUFA的缺点。

一种磷脂型多不饱和脂肪酸的酶法制备方法：采用脂肪酶和/或磷脂酶为催化剂，催化剂为具有脂肪酶活力的酶制剂，酶制剂选用固定化方式，采用A、B、C、D和E五种组分为底物的催化体系，进行催化反应，控制反应温度为30～80℃；反应时间为6～48hr；控制催化剂的加入量为底物质量的1‐5％；

A：游离脂肪酸型PUFA；

B：甘油酯型PUFA；