[发明专利]一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程和生物技术领域。具体涉及一种油菜抗菌肽BnCRP1及其应用。

背景技术

病原菌可引起包括人类，牲畜，作物和其他生物的严重病害，造成严重的经济损失。植物病原真菌是植物的重要病原菌，可引起80％以上的植物病害(张福丽，王占斌，王志英.几丁质酶在植物抗真菌病害中的作用.林业科技.2006，31(3)：24-27)，造成世界粮食作物减产约20％(Knight S.C.,Anthony V.M.,Brady A.M.,et al.Rationale and perspectives on the developmentof fungicides.Annu Rev Phytopathol,1997,35:349-372)。许多重要植物病害都是真菌造成的，如马铃薯晚疫病、稻瘟病、小麦白粉病、玉米大小斑病菌、大豆灰斑病、油菜菌核病等，每年都造成非常巨大的经济损失。另一方面，真菌在侵染植物的过程中，释放出来的代谢产物——真菌毒素(mycotoxin)，对农作物以及人类的健康也造成极大的危害，如黄曲霉毒素(aflatoxin)等。

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)属于子囊菌亚门、盘菌纲、柔膜菌目、核盘菌科、核盘菌属。是一种危害作物和蔬菜的世界性的重要的植物病原菌。核盘菌可以广泛地侵染很多单子叶和双子叶植物。核盘菌引起的菌核病是一种类似于灰霉的腐生营养型真菌，这种破坏性病源侵染超过400种植物，分布广泛。目前对菌核病的防治主要依靠化学农药，然而化学防治不仅成本高、污染环境，而且防效也不理想；同时，食品的安全性也受到严重影响。油菜是世界上重要的油料作物之一，菌核病造成油菜的根，茎和角果的腐烂，导致了巨大的产量损失。尽管菌核病严重威胁了农业生产，植物对核盘菌的寄主抗性的分子机制，我们依然知之甚少。暨今为止还没有发现完全免疫或者高抗的油菜栽培品种(Liu,S.,Wang,H.,Zhang,J.,Fitt,B.D.,Xu,Z.,Evans,N.,Liu,Y.,Yang,W.,and Guo,X.2005.In vitro mutation and selection of doubled-haploid Brassica napus lines with improved resistance to Sclerotinia sclerotiorum.Plant Cell Rep.24:133-144),因此，探究植物对这种病源的抗性机制，发现新的抗性基因具有深远意义。

目前常用的病害防治措施，主要依靠化学农药，然而化学防治不仅成本高、污染环境，而且防效也不理想；同时，食品的安全性也会受到严重影响。随着社会的进步，人们越来越深刻地认识到长期大量使用化学农药对生态环境和人类健康的危害。生物防治可以有效地克服这些弊端,因而生物农药越来越受到人们的重视。

抗菌肽(antimicrobial peptides，AMPs)是一类具有抗菌活性的天然小分子蛋白，广泛存在于生物界，是机体非特异性免疫的重要组成部分，在体内体外均具有抗菌活性(Gordon YJ,Romanowski EG,A Review of Antimicrobial Peptides and Their Therapeutic Potential as Anti-Infective Drugs.Curr Eye Res.2005,30(7):505–515)。抗菌肽的广泛的生物学活性，对细菌真菌、原生动物、病毒和肿瘤等有很强的抑制作用，具有高效、环保、不使病原菌产生耐药性等优点使它在生物防治和医学上具有良好的应用前景(Gordon YJ,Romanowski EG,A Review of Antimicrobial Peptides and Their Therapeutic Potential as Anti-Infective Drugs.Curr Eye Res.2005,30(7):505–515)。近年来已经成为植物抗病基因工程、养殖饲料添加剂，食品防腐剂、新兴医药等领域的研究热点，在疾病防治领域中是抗生素的理想替代品(Boman HG，Peptide antibiotics and their role in innateimmunity.Annu Rev Immuno1.1995，13：6l-92)。在农业生产过程中，用抗菌肽进行植保工作可以避免农用抗生素通过食物链的传递对人体产生的威胁。