[发明专利]一种基于聚乙二醇修饰的传感器及其检测凝血酶的方法在审
| 申请号: | 201510045515.8 | 申请日: | 2015-01-29 |
| 公开(公告)号: | CN104634963A | 公开(公告)日: | 2015-05-20 |
| 发明(设计)人: | 高力;李琴;李娆琪;时海霞;严丽荣;陈克平;张春霞;连超群 | 申请(专利权)人: | 江苏大学 |
| 主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/573 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 212013 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 聚乙二醇 修饰 传感器 及其 检测 凝血酶 方法 | ||
1.一种基于聚乙二醇修饰的传感器,所述传感器为石墨烯氧化物—核酸适配体传感器,其特征在于,所述传感器是经过聚乙二醇修饰。
2. 一种基于聚乙二醇修饰的传感器,其特征在于,按照以下方法制备:
(1)制备石墨烯氧化物:通过改良的Hummers法大批量制备石墨烯氧化物,将石墨烯氧化物真空干燥备用,使用前,在水溶液中超声分散;
(2)聚乙二醇的修饰:加入聚乙二醇,聚乙二醇通过自组装与石墨烯氧化物表面相结合,阻止凝血酶非特异吸附;
(3)合成凝血酶的核酸适配体:5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’,5’末端标记羧基荧光素(FAM);
(4)荧光淬灭:将的核酸适配体加入到石墨烯氧化物水溶液中,即制备成为基于聚乙二醇修饰的检测凝血酶的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器;石墨烯氧化物能够淬灭核酸适配体末端标记的FAM的荧光。
3. 根据权利要求2所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器,其特征在于,步骤(2)中所述加入的聚乙二醇的浓度为50 nM。
4. 根据权利要求2所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器,其特征在于,步骤(3)中所述核酸适配体的浓度为5-40 nM;石墨烯氧化物的浓度为6 -50 μg/mL。
5. 如权利要求1所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法,其特征在于,按照以下步骤进行:
(1)制备石墨烯氧化物:通过改良的Hummers法大批量制备石墨烯氧化物,将石墨烯氧化物真空干燥备用,使用前,在水溶液中超声分散;
(2)聚乙二醇的修饰:加入聚乙二醇,聚乙二醇通过自组装与石墨烯氧化物表面相结合,阻止凝血酶非特异吸附;
(3)合成凝血酶的核酸适配体:5’- GG TTG GTG TGG TTG G -3’,5’末端标记羧基荧光素(FAM);
(4)荧光淬灭:将核酸适配体加入到石墨烯氧化物水溶液中,即制备成为基于聚乙二醇修饰的检测凝血酶的石墨烯氧化物—核酸适配体传感器;石墨烯氧化物能够淬灭核酸适配体末端标记的FAM的荧光;
(5)凝血酶的检测:加入凝血酶,核酸适配体结合凝血酶后,FAM的荧光得到恢复,根据荧光强度的变化,从而对其进行检测。
6. 根据权利要求5所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法,其特征在于,步骤(2)中所述加入的聚乙二醇的浓度为50 nM。
7. 根据权利要求5所述的一种基于聚乙二醇修饰的传感器检测凝血酶的方法,其特征在于,步骤(3)中所述核酸适配体的浓度为5-40 nM;石墨烯氧化物的浓度为6 -50 μg/mL。
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