[发明专利]一种灯盏花颗粒指纹图谱及其建立方法与应用

权利要求书

1.一种灯盏花颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于，采用高效液相色谱法，具体包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：精密称取灯盏花乙素、灯盏花甲素、野黄芩素对照品，以甲醇、乙醇或碱水为溶剂配成对照品溶液；

(2)样品溶液的制备：精密称取灯盏花颗粒，精密加入甲醇水溶液，超声振荡，滤过，作为样品溶液；

(3)色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料，采用梯度洗脱，流动相为乙腈-醋酸铵水溶液组成梯度洗脱溶液，所述梯度洗脱包括以下具体步骤：

0分钟时，流动相A为13％的乙腈溶液、流动相D为87％的0.1％的醋酸铵溶液；

15分钟时，流动相A为15％的乙腈溶液、流动相D为85％的0.1％的醋酸铵溶液；

23分钟时，流动相A为17％的乙腈溶液、流动相D为83％的0.1％的醋酸铵溶液；

24分钟时，流动相A为17％的乙腈溶液、流动相D为83％的0.1％的醋酸铵溶液；

48分钟时，流动相A为18％的乙腈溶液、流动相D为82％的0.1％的醋酸铵溶液；

50分钟时，流动相A为20％的乙腈溶液、流动相D为80％的0.1％的醋酸铵溶液；

65分钟时，流动相A为20％的乙腈溶液、流动相D为80％的0.1％的醋酸铵溶液；

(4)测定：精密吸取步骤(1)中的对照品溶液和步骤(2)中的样品溶液分别注入高效液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。

2.如权利要求1所述的灯盏花颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括：取灯盏花颗粒适量研细，精密称取700mg，置50ml具塞锥形瓶中，精密加入75％的甲醇溶液25ml，超声振荡40min，放冷，再称定重量，用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，用0.45μm的滤膜过滤，作为样品溶液。

3.如权利要求1所述的灯盏花颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述色谱条件柱温为10-50℃。

4.如权利要求1所述的灯盏花颗粒指纹图谱的建立方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述色谱条件紫外检测波长为210-380nm。

5.如权利要求4所述的灯盏花颗粒指纹图谱在灯盏花颗粒质量控制方面的应用。