[发明专利]一种饱和氯化钠法快速批量提取血液DNA的试剂盒和方法

权利要求书

1.一种饱和氯化钠法快速批量提取血液DNA的试剂盒，其特征在于，包括红细胞裂解液、去蛋白液、蛋白沉淀液、调节结合液、洗脱液和蛋白酶K溶液；

其中，所述红细胞裂解液包含8.29g/L的NH₄Cl，31g/L的KHCO₃和0.37g/L的Na₂EDTA，pH 7.2-7.4；；所述去蛋白液为10％SDS；所述去蛋白沉淀液为饱和NaCl；所述调节结合液为异丙醇；所述洗脱液为70％乙醇；所述蛋白酶K溶液浓度为20mg/ml。

2.一种用权利要求1所述试剂盒快速批量提取血液DNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)裂解细胞：在血液样品中加入所述红细胞裂解液，所述蛋白酶K溶液，所述去蛋白液，充分混匀，放入水浴锅中56℃左右消化；

(2)沉淀蛋白质：向已消化完成的血液样品中加入所述去蛋白沉淀液，震荡摇匀后，离心，留上清液；

(3)沉淀DNA：将所述上清液中加入所述调节结合液，摇匀离心，弃上清液留DNA沉淀；

(4)纯化DNA：将所述DNA沉淀用所述洗脱液洗涤，洗涤干净后，离心得DNA样品。

3.根据权利要求2所述的用所述试剂盒快速批量提取血液DNA的方法，其特征在于，将提取的DNA风干，并用双蒸水或1×TE缓冲液溶解，于4℃、-20℃或-80℃冰箱保存备用。

4.根据权利要求2所述的用所述试剂盒快速批量提取血液DNA的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述血液样品与所述红细胞裂解液的体积比为1：40，所述红细胞裂解液、所述蛋白酶K溶液和所述去蛋白液的体积比为20-30：1-1.5：8-10。

5.根据权利要求2所述的用所述试剂盒快速批量提取血液DNA的方法，其特征在于，步骤(4)中，所述DNA沉淀用所述洗脱液重复洗涤。

6.根据权利要求2所述的用所述试剂盒快速批量提取血液DNA的方法，其特征在于，所述离心条件为12000rpm，4℃离心。