[发明专利]高密度脂蛋白模拟肽在动员内皮祖细胞修复内皮损伤的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及高密度脂蛋白模拟肽Reverse-D-4F的应用领域，具体为高密度脂蛋白模拟肽在动员内皮祖细胞的药物中的应用。

背景技术

动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是危害人类健康最严重的心脑血管疾病之一，故阻止AS的进展已成为基础医学与临床医学研究的热点。一些危险因素（如高脂食物、吸烟和高血压等）诱导的内皮损伤是AS的始动因素，因此维持内皮完整是防治AS的重要策略之一。起初认为受损的内皮细胞由临近完整内皮组织修复，但这些内皮细胞增殖分裂50代之后即会老化，导致成熟内皮细胞修复受损内皮的能力有限，最近研究证明，体内血液循环中存在一些内皮祖细胞（endothelial progenitor cells，EPC），它们起源于骨髓单个核细胞（mononuclear cells, MNCs），并参与血管内膜修复和AS斑块的发生发展。但心血管病人外周血中内皮祖细胞数量减少，且功能（如增殖、迁移和成血管）也受到一定损伤，因此怎样动员外周血内皮祖细胞数量和提高内皮祖细胞功能去修复受损内皮是减轻AS发生发展的一个新的治疗思路。

发明内容

本发明针对以上不足之处，提供了一种高密度脂蛋白模拟肽在动员内皮祖细胞修复内皮损伤的药物中的应用，为上调血浆中SDF-1α水平提供了新的技术手段，也为Reverse-D-4F保护心血管系统提供了新的思路和策略。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：高密度脂蛋白模拟肽在动员内皮祖细胞修复内皮损伤的药物中的应用。

所述高密度脂蛋白模拟肽是指 Reverse-D-4F。

高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）具有明显的抗AS功能，重组HDL制品和HDL蛋白结构与功能模拟肽的报道为AS的防治打开了又一扇明亮的窗户。美国伯明汉Anantharamaiah 课题组通过对HDL的主要蛋白成分载脂蛋白A I（APOA I）的抗AS结构特征和生物学特性研究发现，APOAI的A型两亲性螺旋结构具有较强的脂质结合能力，其模拟肽是人工合成的具有APOAI类似功能的两亲性螺旋肽类。申请人先前在美国加州大学的课题组和Navab课题组的研究分别证明由人工合成的该模拟肽的18个氨基酸肽链RD4F和D4F均能够抑制血脂紊乱所导致的小鼠AS。2006年Tso等实验证明重组HDL可以增强内皮祖细胞介导的内皮修复。随后Oostrom 等报道重组HDL可以增加II型糖尿病人循环血液中内皮祖细胞的数量。申请人新近的研究表明，模拟肽通过增强人主动脉内皮细胞NO分泌，抑制脂多糖和肿瘤坏死因子诱导的人主动脉内皮细胞的炎症细胞趋化作用，从而发挥可能的内皮细胞保护功能，而在内皮修复再生中起重要作用的EPC是否也与模拟肽的内皮保护作用有关迄今尚无答案。结合申请人课题组前期的实验结果，即应用动物模型证实HDL 的主要蛋白成分APOAI模拟肽具有抗AS作用，并依据内皮系统损伤修复可能涉及新近提出的血管壁祖细胞理论，申请人等假设APOAI模拟肽的抗AS作用可能通过动员EPC和增强EPC的损伤修复能力并完成对动脉血管壁受损内皮的修复，从而保护内皮系统结构与功能的完整性，最终减少AS的发生。本研究把C57 BL/6小鼠分为四组，分别为正常饮食、正常饮食和模拟肽、高脂饮食、高脂饮食和模拟肽，首先流式分析外周血EPC数量，免疫荧光检测动脉壁EPC数量，ELISA检测外周血细胞因子和炎症因子，其次体外培养内皮祖细胞探讨APOAI模拟肽对肿瘤坏死因子α（TNF-α）诱导的EPC损伤修复的作用机制。

本发明首先将6周龄C57 BL/6小鼠分为四组喂养16周，分别为正常饮食、正常饮食和Reverse-D-4F（1mg/Kg/d）、高脂饮食、高脂饮食和Reverse-D-4F（1mg/Kg/d），流式分析外周血EPC数量，免疫荧光检测动脉壁EPC数量，ELISA检测外周血细胞因子和炎症因子，其次体外培养内皮祖细胞探讨APOAI模拟肽对TNF-α诱导的EPC损伤修复的作用机制。