[发明专利]SRY基因引物对与探针的组合和SRY多位点检测试剂盒有效
申请号: | 201510028379.1 | 申请日: | 2015-01-20 |
公开(公告)号: | CN104630214B | 公开(公告)日: | 2017-02-22 |
发明(设计)人: | 胡松 | 申请(专利权)人: | 胡松 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12Q1/68 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙)11350 | 代理人: | 肖平安 |
地址: | 528511 广东省佛山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | sry 基因 引物 探针 组合 多位点 检测 试剂盒 | ||
技术领域
本发明涉及一种基因引物与探针的组合以及包含该组合的试剂盒。更确切的说,是一种SRY基因引物与探针的组合和实时荧光SRY多位点基因检测试剂盒。
背景技术
目前检测SRY基因一般采用PCR技术,其观察结果主要为凝胶电泳成像法,耗时,耗力且易污染,由于其检测的高灵敏度极易产生假阳性。然而针对极少数情况会采用多重PCR技术,但DNA浓度低时同管多条引物对相互抑制,易造成灵敏度下降,有时会产生假阴性。以上两者,均会使测试结果造成错误,正确率难以保证。目前常规采用的方法:例如绒毛样本检测及羊膜腔穿刺取羊水细胞等,都属于创伤性的,对母亲及胎儿均有一定的风险。
发明内容
目的在于现代遗传咨询中要求做产前性别判断的越来越多,故在不刺激孕妇子宫的情况下,就可以做染色体分析的无创伤性性别检测,还可以通过检测男性个体不同时期SRY基因表达的量来监测个体盛衰的变化,日益引起广大医学家的关注。
发明具体内容如下:
一种SRY基因引物对和探针的组合,包括一个探针,一对SRY基因引物,其特征在于:所述探针为TaqMan探针,所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物;
其中所述的一种关于SRY基因引物对和探针的组合,其特征在于:所述SRY基因序列号位于YP11.3,只含有一个外显子,没有内含子,转录单位长约1.1KB编码一个204氨基酸的蛋白质;
一种实时荧光SRY多位点基因检测试剂盒:包括4组如权利要求1或2所述的SRY基因引物对和探针的组合,其特征在于:
所述第一引物对中的正向引物的序列为:
5'CGAACTCTGGCACCTTTCAATT 3'
第一引物对中的反向引物的序列为:
3'CGCTTAACATAGCAGAAGCATATGA5'
第一探针的序列为:
FAM-TGTCGCACTCTCCTTGTTTTTGACAATGC-TAMRA
所述第二引物对中的正向引物的序列为:
5'TCTTCCAGGAGGCACAGAAATT 3'
第二引物对中的反向引物的核苷酸序列为:
3'TTCCGACGAGGTCGATACTTATAAT5'
第二探针的序列为:
FAM-CAGGCCATGCACAGAGAGAAATACCCG-TAMRA
所述第三引物对中的正向引物的序列为:
5'GCCGAAGAATTGCAGTTTGC3'
第三引物对中的反向引物的序列为:
3'AGTTGCACTTCGCTGCAGAGT5'
第三探针的序列为:
FAM-CCCGCAGATCCCGCTTCGG-TAMRA
所述第四引物对中的正向引物的序列为:
5'ACGAAAGCCACACACTCAAGAA3'
第四引物对中的反向引物的序列为:
3'GTGAGCTGGCTGCGTTGAT5'
第四探针的序列为:
FAM-AGCACCAGCTAGGCCACTTACCGCC-TAMRA
【附图说明】
图1为第一引物对和探针PCR荧光扩增原理图
图2为第二引物对和探针PCR荧光扩增原理图
图3为第三引物对和探针PCR荧光扩增原理图
图4为第四引物对和探针PCR荧光扩增原理图
图5为核酸扩增荧光检测结果分析阴性图
图6为核酸扩增荧光检测结果分析阳性图
【具体实施例】
以下为本发明的实施例:
一种SRY基因引物对和探针的组合,包括一个探针,一对SRY基因引物,其特征在于:所述探针为TaqMan探针,所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物;
其中所述的一种关于SRY基因引物对和探针的组合,其特征在于:所述SRY基因序列号位于YP11.3,只含有一个外显子,没有内含子,转录单位长约1.1KB编码一个204氨基酸的蛋白质;
一种实时荧光SRY多位点基因检测试剂盒:包括4组如权利要求1或2所述的SRY基因引物对和探针的组合,其特征在于:
所述第一引物对中的正向引物的序列为:
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