[发明专利]啤酒花总黄酮提取物、制备方法及其作为制备预防和治疗肝损伤、癌症药物的应用

说明书

本发明属于医药技术领域，涉及啤酒花总黄酮提取物物制备方法及其在保肝、抑制肿瘤细胞生长、醌还原酶诱导等方面的应用。可用于预防和治疗肝损伤、癌症药物的开发。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及啤酒花(Humunus Lupulus L)总黄酮、制备方法和用于制备预防和治疗肝损伤、癌症药物的应用。

背景技术

啤酒花(Humulus Lupulus L.)又称忽布，香蛇麻，性味甘苦，微平。是桑科葎草属多年生草质蔓生藤本,雌雄异株,花单性,雌性球穗花序简称酒花。它是一种较耐寒不耐热的植物,主要分布于我国西北地区、新疆北部、东北、华东及山东、甘肃、陕西等地。目前,我国啤酒花产量约占全世界的13％,仅次于美国和德国,居世界第三位。

啤酒花是酿造啤酒的主要原料之一，它能够赋予啤酒特殊的苦味和独特的风味，增强啤酒的非生物稳定性和泡持性，并具有一定的防腐性能，被誉为“啤酒的灵魂”。除主要用于啤酒酿造外，啤酒花作为一种重要的药用植物，它的应用历史也很悠久。13世纪开始，啤酒花开始作为草药来使用。我国明代李时珍的《本草纲目》所引的宋代《开宝本草》中的一种中药“陀得花”指的就是啤酒花。据报道，啤酒花可用于防腐、健胃、安神、镇定、催眠、杀菌、抗炎和利尿，还可用于治疗消化不良、失眠、肺结核、麻风病等。

近年来对啤酒花提取物或其中所含有的化合物的药理作用多集中在抗菌、抗氧化、镇静和雌激素样作用等方面。对啤酒花中的主成分啤酒花总黄酮的保肝和癌症化学预防、治疗方面尚未报道。

发明内容

本发明的目的在于提供啤酒花总黄酮提取物，主要由黄腐酚、黄腐酚B、黄腐酚C、黄腐酚G、黄腐酚I组成，其中黄腐酚含量>60％。

本发明的目的还在于提供啤酒花总黄酮制备方法。该方法包括如下步骤：

(1)干燥啤酒花，粉碎后用乙醇或甲醇提取，减压回收提取液得粗提物；

(2)将上述提取物经非极性大孔吸附树脂处理，用溶剂进行梯度洗脱，收集合并含啤酒花总黄酮的洗脱液，减压浓缩，得啤酒花粗总黄酮；

或将上述提取液依次用石油醚或环己烷、二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯萃取，减压浓缩二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯萃取液得啤酒花粗总黄酮；

(3)步骤(2)所得啤酒花粗总黄酮经聚酰胺柱色谱处理，用溶剂进行梯度洗脱，收集合并含啤酒花总黄酮的洗脱液，减压浓缩，干燥，得精制啤酒花总黄酮；

或将啤酒花粗总黄酮经硅胶柱色谱处理，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集合并含啤酒花总黄酮的洗脱液，减压浓缩、干燥得精制啤酒花总黄酮。

本发明提供的啤酒花总黄酮制备方法，其中步骤(1)中所述的提取方法为加热回流提取或加热超声提取1-3次。所用溶剂为：体积浓度为60％-100％的乙醇或甲醇。药材与溶剂重量体积比为1:5～1:15，优选1:6～1:10。步骤(2)中所述大孔吸附树脂洗脱剂为甲醇/水或乙醇/水，混合体积比例为1：9～9：1，甲醇/水或乙醇/水混合体积比优选3：7～7：3。步骤(2)用石油醚或环己烷、二氯甲烷或氯仿、乙酸乙酯依次萃取的次数为1-4次，萃取溶剂与提取液的体积比为1:1～3:1。

步骤(3)中所述聚酰胺柱色谱流动相为甲醇和水混合溶剂、或乙醇和水混合溶剂，混合溶剂体积比为1：9～9：1，甲醇和水混合溶剂或乙醇和水混合溶剂体积比优选3：7～7：3洗脱部分得啤酒花总黄酮。

步骤(3)中所述硅胶柱色谱流动相为二氯甲烷和丙酮、氯仿和丙酮、二氯甲烷和甲醇、氯仿和甲醇、二氯甲烷和乙酸乙酯或氯仿和乙酸乙酯混合溶剂，混合溶剂体积比为比例为100：1～1：1，优选20：1～3:1洗脱部分得啤酒花总黄酮。

本发明提供的总黄酮具有保肝、抑制肿瘤细胞生长、醌还原酶诱导作用，可用于预防和治疗肝损伤、癌症药物的开发和应用。