[发明专利]敷料皮的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物源性生物敷料病毒灭活技术领域，特别是涉及一种敷料皮的制备方法。

背景技术

现有的用于烧伤、热力伤或化学伤采用的异种皮常为猪皮。猪皮与人的皮肤结构相似，它能较好地粘附在创面上，起到减少创面水分蒸发、减少电解质流失、阻隔细菌和控制感染的作用，临床效果佳，是一种较好的可供选择的异体皮，在烧伤、烫伤领域得到较广泛的应用。猪皮作为一种动物源性的创面敷料皮，其病毒携带量必须得到严格控制。因此，病毒灭活工艺的选择至关重要。目前，烧烫伤用猪皮主要是利用γ射线(伽玛射线)辐照进行病毒灭活。

依据国家药监局相关文件的规定，在每步灭活步骤中，病毒降低量达到4Logs(即LgTCID₅₀/ml)以上，认为灭活病毒方法有效；且各步骤对病毒的灭活作用可以叠加。病毒降低量越大，盲传三代无病毒检出，说明灭活工艺效果越好，敷料皮的安全性越高。研究发现，虽然利用γ射线辐照能使猪皮病毒降低量达到4Logs以上，认为该方法有效，但是含脊髓灰质炎病毒sabinI型病毒(PV1)样品辐照后加入细胞盲传三代均出现细胞病变，说明PV1病毒灭活不够彻底。为提高敷料皮的安全性能，应设法进一步提高病毒灭活效率。

发明内容

基于此，有必要针对病毒灭活效率不高的问题，提供一种病毒灭活效率和安全性高的敷料皮的制备方法。

一种敷料皮的制备方法，包括以下步骤：

将异种皮原料脱毛，刮去脂肪和角质层，得到厚度为0.3～0.5mm的异种皮料；

将所述异种皮料依次用NaCl溶液浸泡、无菌水清洗、用37℃的质量分数为0.2～0.5％的中性蛋白酶溶液浸泡、无菌水清洗得到异种皮；及

将所述异种皮进行灭活处理得到敷料皮，所述灭活处理包括：将所述异种皮在50～60℃下加热60～120分钟，及将所述异种皮用γ射线辐照。

在其中一个实施例中，所述NaCl溶液的浓度为0.5～2mol/L，所述NaCl溶液浸泡的时间为12～24h。

在其中一个实施例中，所述中性蛋白酶溶液浸泡的时间为2～6h。

在其中一个实施例中，所述将异种皮在50～60℃下加热60～120分钟的具体操作为：将异种皮置于振荡器中，在恒温水浴中控温在50～60℃下加热60～120分钟。

在其中一个实施例中，所述振荡器的振荡频率为100～110rpm。

在其中一个实施例中，所述加热的时间为90～120min。

在其中一个实施例中，所述γ射线由放射性同位素钴-60产生，辐照剂量为15～25kGy。

在其中一个实施例中，所述辐照剂量为25kGy。

在其中一个实施例中，所述将所述异种皮进行灭活处理得到敷料皮之前，将所述异种皮用无菌生理盐水洗涤。

在其中一个实施例中，所述NaCl溶液的浓度为1mol/L，所述NaCl溶液浸泡的时间为20h，所述中性蛋白酶溶液的质量分数为0.35％，所述中性蛋白酶溶液浸泡的时间为4h。

上述敷料皮的制备方法操作简单、成本低廉，可完全灭活PRV、VSV、PV1和PPV四种病毒，与单一的γ射线辐照的病毒灭活工艺相比，上述敷料皮的制备方法病毒灭活效率显著提高，得到的敷料皮PRV、VSV、PV1和PPV 四种病毒检测均合格，解决了单独用γ射线辐照不能完全灭活PV1病毒的问题，提高了敷料皮的安全性。

具体实施方式

为了便于理解本发明，下面对本发明进行更全面的描述。并给出了本发明的较佳的试验。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的试验。相反地，提供这些试验的目的是使对本发明的公开内容的理解更加透彻全面。

除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的试验的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。

一实施方式的敷料皮的制备方法，包括以下步骤：

S100：将异种皮原料脱毛，刮去脂肪和角质层，得到厚度为0.3～0.5mm的异种皮料。

优选地，异种皮料的厚度为0.3mm。

优选地，异种皮原料为猪皮原料，猪皮与人的皮肤结构相似，它能较好地粘附在创面上，起到减少创面水分蒸发、减少电解质流失、阻隔细菌和控制感染的作用，临床效果佳，是一种较好的可供选择的异体皮，在烧伤、烫伤领域得到较广泛的应用。