[发明专利]一种抗黑色素瘤的干细胞贴剂及其制备方法

权利要求书

1.一种抗黑色素瘤的干细胞贴剂，其特征在于，由下述主要原料和基质部分制备而成，主要原料包括1×10⁶个来源于骨髓的间充质干细胞，1000U白细胞介素Ⅱ、100mg维生素C和20μl富血小板血浆，基质部分包括生物膜和医用级粘贴层。

2.根据权利要求1所述的一种抗黑色素瘤的干细胞贴剂，其特征在于，至少包括1×10⁶个来源于骨髓的间充质干细胞。

3.权利要求1所述的一种抗黑色素瘤的干细胞贴剂的制备方法，其特征在于，由下述步骤组成：来源于骨髓的间充质干细胞的制备，生物膜的制备和预处理，间充质干细胞生物膜的构建，间充质干细胞生物膜的诱导和抗黑色素瘤的干细胞贴剂形成：其中，所述的来源于骨髓的间充质干细胞的制备步骤具体是：分离提取来源于骨髓间充质干细胞，混匀成单细胞悬液备用；

所述的生物膜的制备和预处理步骤具体是：制备高分子聚乙内酯多元醇-胶原复合生物膜作为基础基质，在细胞接种前进行生物膜的预处理；将生物膜置入适宜大小的培养皿中，用3M的NaOH于37℃浸泡2h，PBS缓冲液浸泡10次，每次15分钟；

所述的间充质干细胞生物膜的构建步骤具体是：将上述步骤制备的生物膜置于培养皿底部，然后接种来源于骨髓的间充质干细胞单细胞悬液，所用的培养基为90%DMEM培养基，和10%胎牛血清替代品，连续培养48小时；

所述的抗黑色素瘤的干细胞贴剂诱导步骤具体是：向上述步骤培养皿更换培养液，仍用90%DMEM培养基，和10%胎牛血清替代品，并添加TNFα诱导培养4-5小时，其中TNFα的诱导浓度为50-100ng/ml，然后将制备的生物膜用PBS清洗两遍并置于37℃、5%CO₂细胞培养箱30分钟后备用；

所述的抗黑色素瘤的干细胞贴剂的形成步骤具体是：将上述步骤制备的生物膜从培养箱中取出，添加1000U的白细胞介素Ⅱ、100mg维生素C和20μl富血小板血浆，然后将生物膜置于由防粘层和粘贴层组成的医用级粘胶层上，即制备完成抗黑色素瘤的干细胞贴剂。