[发明专利]一种制备具有抗氧化活性的青钱柳提取物的方法及其作为醛糖还原酶抑制剂的应用

说明书

本发明公开了一种制备具有抗氧化活性的青钱柳提取物的方法及该提取物作为醛糖还原酶抑制剂的应用，包括步骤粉碎、浸泡、提取和冷冻干燥，与传统热回流提取法相比，本发明采用的超声提取法有效成分破坏少，提取率高，提取时间短、能耗低。所得提取物具有良好的抗氧化及抑制醛糖还原酶的作用，对醛糖还原酶的抑制机理为反竞争性抑制，该提取物具有预防或治疗糖尿病并发症包括糖尿病肾病、糖尿病神经病变和糖尿病眼病等的前景。并且作为天然提取物，具有副作用小，安全性高，活性好，工艺简便等优点。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种制备具有抗氧化活性的青钱柳提取物的方法及制备的提取物作为醛糖还原酶抑制剂的应用。

背景技术

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一组由多病因引起的以慢性高血糖为特征的终身性代谢性疾病。糖尿病本身不一定造成危害，但长期血糖增高，大血管、微血管受损并危及心、脑、肾、周围神经、眼睛、足等，据世界卫生组织统计，糖尿病并发症高达100多种，是目前已知并发症最多的一种疾病。为此预防糖尿病的并发症是至关重要的社会问题。

目前，糖尿病并发症的治疗依赖于对血糖的控制，然而，随着胰岛素等药物的使用，糖尿病患者的血糖水平虽可以得到很好的控制，但临床上仍有许多患者相继出现进展性的肾脏、神经、视网膜等损害。因此标准的抗糖尿病药物并不适合作为糖尿病并发症治疗的药物选择，迫切需要用于糖尿病并发症的药物和治疗方式。

多元醇通路(polyol pathway，PP)是机体葡萄糖代谢的重要途径之一，多元醇通路的参与是由高浓度葡萄糖诱导的多种器官损伤的机制。其中醛糖还原酶(aldosereductase，AR)是该通路的关键限速酶。已经认为高氧化应激是多元醇通路参与细胞损伤的机制之一，即DM患者受体内高糖环境影响，糖氧化的增加和PP等通路的激活，导致机体氧化和抗氧化失衡，活性氧自由基产生过多，造成对组织和细胞的损伤,最终导致糖尿病眼病、糖尿病肾病、糖尿病神经病变等多种DM并发症的发生。另一方面，AR活性的增强又可激活PP，造成大量代谢产物山梨醇在细胞内堆积，使细胞结构的完整性和功能受到影响，最终引发一系列病变。但是目前可供临床使用的醛糖还原酶抑制剂依然很少，且多由人工合成，有些已经由于临床试验存在问题而退出。可见，具有AR抑制活性的天然抗氧化物质，在DM及其并发症治疗方面具有潜在的应用价值，且具有高效低毒的优点。

青钱柳，又名摇钱树、麻柳，胡桃科，我国南方多省均有发现，多以零星分布。据《中国中药资源志要》记载，其树皮、树叶具有清热消肿和止痛等功能。青钱柳因含有大量生物活性物质而具有独特的保健和药用价值。但是其对AR的抑制作用以及通过干预氧化应激和抑制AR而用于糖尿病并发症的防治，在国内外均未见相关研究报道。本发明可进一步扩大青钱柳药材的开发和利用，同时也为糖尿病患者的健康提供新的保障，可产生良好的社会效益和可观的经济效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种制备具有抗氧化活性的青钱柳提取物的方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

制备具有抗氧化活性的青钱柳提取物的方法，包括步骤：

1)粉碎：青钱柳叶70～80℃烘干，粉碎机粉碎，过筛；

2)浸泡：按照药材与水重量比为1:10～30加水浸泡过夜；

3)提取：将步骤2)的混合溶液，以400～600W功率超声处理30～50分钟，温度45～55℃；趁热用四层100～200目滤布过滤，再用布氏漏斗抽滤，收集滤液，加入1％～3％的活性炭脱色，减压浓缩；

4)冷冻干燥：-15～-25℃，-0.02kPa以下冷冻干燥，得棕褐色粉末,即为所述具有备抗氧化活性的青钱柳提取物，简称CP。

作为对上述技术方案的改进，所述步骤1)中，所述粉碎机粉碎具体为将干燥青钱柳叶粉碎后过40目筛。