[发明专利]一种脂溶性铂配合物及其制剂有关物质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种米铂原料药及其制剂的有关物质检测方法，更具体的说是通过高效液相色谱法检测米铂原料及冻干粉针中有关物质的方法。

背景技术

在药物分析中所称的“有关物质(related substances)”是指特定药物中不是主要组成物，但与成份相关的物质。由于一种药品从合成原料药到制备有关的制剂，再经贮藏、运输、使用，要经历一段较为复杂和漫长的过程，在此期间，每一过程都有可能产生有关的物质，如生产中可能带入起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际情况，因此，国内外对药物的研究，可允许含有一定限量的无害或低毒性的有关物质，但对毒性较大，能危害人体健康的、无效的或能影响药物稳定性的有关物质则必须严格控制。因此有关物质检测是控制药品质量的重要指标。

米铂(Miripla)是日本住友公司开发的一种新型脂溶性铂类抗肿瘤药物，其化学名称为顺式-[双十四烷酸-(1R，2R)-1，2-环己二胺合铂(Ⅱ)]单水合物，结构式为：

米铂原料及其制剂的有关物质检测难度在于合成过程中产生的多种工艺杂质，通过纯化后与主成分难于分离。经研究发现米铂原料及其制剂中主要含有四种已知杂质，分别为：

(1)杂质A：十四酸

(2)杂质B：双水[(1R,2R)-1,2-环己二胺-N,N’]合铂二硝酸盐

(3)杂质C：(SP-4-2)-[(1S,2S)-1,2环己二氨-N,N’]二(十四酸-O)合铂一水合物

(4)杂质D：(SP-4-2)-[(1S,2R)-1,2环己二氨-N,N’]二(十四酸-O)合铂一水合物

其中，杂质A为脂溶性成分，杂质B为水溶性成分，杂质C和D为手性杂质应首选手性色谱柱进行测定。

中国专利申请201410151902.5提供了一种米铂杂质的检测方法，对于手性杂质的检测该专利提供了一种使用SUMICHIRALOA-2500(4.6mm×250mm 5μm)色谱柱，以正己烷-甲醇-乙醇(97:3:0.5)为流动相的检测方法；对于其他杂质的检测该申请提供一种以甲醇：乙醇(80:20)为流动相的等度检测方法。申请人对中国专利申请201410151902.5提供的有关物质检测方法进行了重复，发现采用该色谱条件检测，杂质A的色谱峰与溶剂峰重叠，杂质A不能有效检出，因此采用等度洗脱条件实现杂质A峰和溶剂峰分离比较困难。本发明采用普通的C18色谱柱，通过调整流动相并采用梯度洗脱法实现了溶剂峰、杂质A及其他多个未知杂质有效分离，分离度达1.5以上，为米铂原料药及制剂的质量控制提供了一种可靠的方法。

发明内容

为了克服现有技术存在的技术缺陷，实现用高效液相色谱法一次进样可以检测米铂及其制剂多种有关物质的技术方案，本发明提供了一种用高效液相色谱法一次进样检测米铂及其制剂中米铂含量及若干有关物质的技术方案，本发明采用梯度洗脱条件实现溶剂峰和杂质A及其他未知杂质的有效分离，各吸收峰的分离度大于1.5。

本发明采用如下技术方案实现本发明目的：

一种用高效液相色谱检测米铂原料及制剂中有关物质的方法，采用的色谱条件为：固定相是以十八烷基键合硅胶为填料的色谱柱；检测波长208～215nm；柱温为38～42℃；流速为0.5～2.0ml/min；流动相A是甲醇和乙醇的混合溶剂，体积比为70:30～95:5；流动相B是水和流动相A的混合溶剂，体积比为70:30～95:5；进行梯度洗脱，梯度条件为：