[发明专利]pVAX-PTX3真核表达载体、构建方法及所表达的PTX3蛋白对猪链球菌2型的抗菌应用

说明书

技术领域

本发明属于猪链球菌病防控研究技术领域，涉及pVAX-PTX3真核表达载体、构建方法及所表达的PTX3蛋白对猪链球菌2型的抗菌应用。

背景技术

Pentraxins是一个具有多功能的蛋白质家族，包括短pentraxins蛋白和长pentraxins蛋白。PTX3蛋白是第一个被确认的长正五聚蛋白^[1，2]，与经典的短正五聚蛋白-C反应蛋白和血清淀粉样蛋白p复合物同属于可溶性识别受体(PRMs)^[3，4]。PTX3主要来源于髓样树突状细胞，但还有多种细胞可表达PTX3，包括成纤维细胞、血管内皮细胞、单核细胞、巨噬细胞、平滑肌细胞、肾上皮细胞、滑膜细胞、软骨细胞、脂肪细胞和肺泡上皮细胞等。

PTX3最先被研究的功能是其可以绑定在某些病原体上，研究还发现PTX3还可以识别分生孢子A烟曲霉、某些革兰氏阳性和革兰阴性细菌(如金黄色葡萄球菌，铜绿假单胞菌，肺炎克雷伯氏菌，鼠伤寒沙门氏菌)和一些病毒株^[5-7]，但PTX3不能识别白色念珠菌或伯克氏菌。有研究发现，PTX3还具有调理素活性，通过Fcγ受体II(FcγRII)和补体依赖途径可提高中性粒细胞识别和吞噬分生孢子。并且通过与FcγRIIA/CD32的结合，PTX3可激活CD11b和增强细胞对烟曲霉分生孢子的吞噬能力。PTX3也可参与抵抗一些病毒感染的过程，研究表明PTX3可分别与人类和小鼠巨细胞病毒(HCMV和MCMV)结合，从而减少在体外环境下病毒对树突状细胞的感染。因此，PTX3^-/-小鼠对病毒的感染比野生型小鼠出现较高的敏感性，并且用重组的PTX3治疗可降低病毒的滴度。此外，PTX3可保护感染MCMV(小鼠巨细胞病毒)的小鼠不受烟曲霉菌的入侵，并分别提高了树突状细胞和T细胞中IL-12和IFN-γ的产生。

猪链球菌(Streptococcus suis，SS)是一种革兰氏阳性菌，依据荚膜多糖抗原的不同，可分为35个血清型(1～34型和1/2型)^[8，9]，其中猪链球菌2型(Streptococcus suis 2，SS2)流行区域最广，感染宿主谱最宽，毒力最强，是一种重要的人畜共患病病原^[10，11]。猪链球菌不仅导致、致猪发病出现败血症、肺炎、关节炎、脑膜炎、肺炎、心内膜炎等症状，还会引起断奶仔猪或育肥猪的突然死亡^[12，13]。猪链球菌病的爆发频繁，给养猪业带来了巨大损失，已经成为一种严重影响养猪业发展的重要病原菌之一^[14]。但是至今，我们对于猪链球菌的致病机理还不十分清楚，目前对猪链球菌2型的致病机理和毒力因子的研究还不是十分透彻，所以对猪链球菌2型仍缺乏行之有效的防治方法。

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