[发明专利]一种聚乙烯基吡咯烷酮‑聚天冬氨酸自组装纳米粒子及其制法和用途

权利要求书

1.一种聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子，其特征是：它是由β-环糊精封端的聚乙烯基吡咯烷酮(β-CD-PVP)和金刚烷封端的聚天冬氨酸[Ad-p(Asp)]通过环糊精端基和金刚烷端基的主客体作用自组装的纳米粒子，所述的β-环糊精封端的聚乙烯基吡咯烷酮具有如下结构：

其中：n＝50-200；

所述的金刚烷封端的聚天冬氨酸[Ad-p(Asp)]，具有如下结构：

其中：n＝30-300。

2.一种制备权利要求1所述的聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子的方法，其特征是它包括如下步骤：

步骤1、单(6-O-(p-对甲基苯磺酸))-β-环糊精的制备

将50gβ-环糊精溶于500mL 0.4M氢氧化钠水溶液，冷却至0℃，然后将35g对甲苯磺酰氯缓慢加入到上述溶液，保持在5℃下，混合溶液搅拌30min，然后快速过滤；滤液用浓盐酸中和至pH＝7.4，继续搅拌1h，将沉淀物抽滤出来，水洗3次，60℃下干燥过夜；

步骤2、单(6-叠氮-6-脱氧)-β-环糊精的制备

将10g单(6-o-(p-对甲基苯磺酸))-β-环糊精悬浮在100mL水中，加热至80℃，然后加入2.53g叠氮化钠，继续搅拌6h至体系澄清，将溶液倾入600mL丙酮中，抽滤得到粗产物，水 洗3次，放置在含有五氧化二磷的80℃真空烘箱内过夜；

步骤3、带炔基-链转移剂的制备

将2mL 2-溴丙酸溶于40mL丙酮中，加入5.3g黄原酸钾，室温反应一天，过滤，旋蒸除去丙酮，氯仿稀释后，水洗3次，无水硫酸镁干燥过夜，过滤，旋蒸除去溶剂，将上述中间产物用30mL二氯甲烷溶解，加入0.5mL丙炔醇，40mg DMAP，以及1.5mL DIC，冰水浴反应1～2天，反应结束后，过滤，蒸馏水洗3次，干燥，过滤，旋蒸得到炔基-链转移剂粗产物，粗产物过200～300目硅胶柱进行纯化，洗脱液为5％乙酸乙酯-石油醚(v/v)；

步骤4、带环糊精-链转移剂的制备

将800mg单(6-叠氮-6-脱氧)-β-环糊精溶于16mL DMF中，加入320mg炔基-链转移剂，20mg CuSO₄·5H₂O，以及160mg抗坏血酸钠，氩气保护下，30℃反应3天，乙醚沉淀，真空干燥得带环糊精-链转移剂β-CD-CTA；

步骤5、β-环糊精封端的聚乙烯基吡咯烷酮的制备

将70mg β-CD-CTA和1.2mg AIBN溶于3mL乙烯基吡咯烷酮，液氮冷冻，抽真空，充氩气，重复两次，70℃反应三天，乙醚沉淀，真空烘箱干燥得β-环糊精封端的聚乙烯基吡咯烷酮，β-CD-PVP；

步骤6、β-苄酯-L-天冬氨酸-N-酸酐BLA-NCA的制备

将1.1162g β-苄酯-L-天冬氨酸(BLA)悬浮在20mL四氢呋喃(THF)中，将692.4mg三光气的2mL THF溶液滴加到BLA悬浊液中，在50℃下回流反应至溶液变澄清，旋蒸除去THF得β-苄酯-L-天冬氨酸-N-酸酐(BLA-NCA)粗产物，用THF/正己烷重结晶纯化；

步骤7、聚天冬氨酸的制备

将750mg BLA-NCA的10mL体积比为9:1的DCM/DMF溶液加入到7.6mg 1-金刚烷胺的2mL二氯甲烷溶液中，氩气保护下，35℃反应48h，反应结束后，乙醚沉淀，真空烘箱干燥得到金刚烷封端的聚(L-天冬氨酸-4-苄酯)，进一步在0.1M氢氧化钠溶液下，脱除苄基，冻干，得到金刚烷封端的聚天冬氨酸，Ad-p(Asp)。

3.权利要求1所述的聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子，其特征是：能负载顺铂药物，制备载顺铂的聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子，PVP-p(Asp)-CDDP。

4.一种制备权利要求3所述载顺铂聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子的方法，其特征是它包括如下步骤：

步骤1.将β-CD-PVP和Ad-p(Asp)溶于蒸馏水中，环糊精与金刚烷摩尔比为0.5:1～1:1，37℃下搅拌两天，确保环糊精-金刚烷主客体作用充分完成；

步骤2.加入顺铂，顺铂与天冬氨酸单元摩尔比例为1:1，37℃避光反应三天，反应结束后，超滤离心纯化，截留分子量：100000的载药粒子，即得到载顺铂聚乙烯基吡咯烷酮-聚天冬氨酸自组装纳米粒子。