[发明专利]一种光滑念珠菌荧光PCR 检测试剂盒在审
申请号: | 201510011617.8 | 申请日: | 2015-01-09 |
公开(公告)号: | CN104561316A | 公开(公告)日: | 2015-04-29 |
发明(设计)人: | 戴立忠;邓中平;张操昊;艾颖娟 | 申请(专利权)人: | 湖南圣湘生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/06;C12R1/645 |
代理公司: | 长沙七合源专利代理事务所(普通合伙) 43214 | 代理人: | 欧颖;吴婷 |
地址: | 410205 湖南省长沙市*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 光滑 念珠菌 荧光 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种光滑念珠菌荧光PCR检测试剂盒,所述试剂盒中包括核酸释放剂和含用于靶核苷酸检测的引物、探针序列的PCR反应液,所述核酸释放剂包括0.01~0.5mmol/L的莎梵婷、50~200mmol/L的氯化钾、质量百分含量为0.01%~2%的十二烷基磺酸钠和体积百分含量为0.05%~1%的乙醇。
2.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述用于靶核苷酸检测的引物序列为,上游引物:5’-GGTCGGATCAGGACAGTTCTACG-3’;
下游引物:5’-CGGCACTGGCTGGATGGT-3’。
3.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述用于靶核苷酸检测的探针序列为:5’-CCGCCCATGTTGGTCAGCTCGATTCT-3’。
4.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括内标及在所述PCR反应液中还包含有内标的引物探针序列,
内标序列为:5’-GAGCCGACCGTTTGTTCCAACGCGTATGCCAATGAAATGAAACTATCGGATTCAAAGGACATTTATGTTTTGGCCCATCCGGTTACCAAAAAAACCCGCAAGCGACC-3’,
内标的上游引物序列为:5’-AGCCGACCGTTTGTTCCAACG-3’;
内标的下游引物序列为:5’-CTTGCGGGTTTTTTTGGTAAC-3’;
内标的探针序列为:5'-TATGCCAATGAAATGAAACTATCGGA-3'。
5.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括CG定量参考品,所述CG定量参考品包括A、B、C、D四个浓度的CG强阳性质粒溶液,溶液A中强阳性质粒的浓度为1.00~5.00E+06CFU/ml,溶液B中浓度为1.00~5.00E+05CFU/ml,溶液C中浓度为1.00~5.00E+04CFU/ml,溶液D中浓度为1.00~5.00E+03CFU/ml。
6.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括预防PCR产物污染的酶混合液,所述酶混合液中包括耐热DNA聚合酶1U/μl~5U/μl和尿嘧啶DNA糖基化酶0.05U/μl~0.2U/μl;且在所述PCR反应液中还包含dUTP。
7.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括CG阳性对照和CG阴性对照,所述CG阳性对照为临床医院收集的浓度为1.00~5.00E+05CFU/ml的CG强阳性样本,所述CG阴性对照为灭菌生理盐水。
8.根据权利要求1所述的检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒中还包括样本浓缩液,所述样本浓缩液中含PEG-6000、NaCl和纯化水。
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