[发明专利]一种人胚胎干细胞定向分化为造血干细胞的方法

说明书

本发明公开了一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂及其制备方法，具体地说所述的干细胞制剂是一种由胚胎干细胞在体外诱导生成的造血干细胞制备而成，所述的干细胞制剂中至少包括（1‑5）×10⁶个源于胚胎干细胞的造血干细胞，一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂的制备方法包括如下步骤：（1）人胚胎干细胞的传代培养，（2）造血干细胞拟胚体的形成，（3）人胚胎干细胞向造血干细胞分化，（4）造血干细胞的培养和传代及检测，（5）干细胞制剂的制备。

技术领域

本发明属于生物医疗技术领域，涉及一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂及其制备方法，具体地说所述的干细胞制剂是一种由胚胎干细胞在体外诱导生成的造血干细胞制备而成。

背景技术

白血病是发生在血液中的癌症，可侵及血液、骨髓以及淋巴系统。白血病可以分为急性白血病和慢性白血病，急性白血病可以进一步分为急性骨髓性白血病（AML）和急性淋巴样白血病（ALL）。慢性白血病包括慢性骨髓性白血病（CML）和慢性淋巴样白血病（CLL）。急性淋巴性白血病（ALL）是一类以淋巴母细胞（不成熟的淋巴细胞的前身）失调增生和分化异常或分化受阻，形成大量非成熟白细胞为特征的快速进展型白血病，约占我国儿童期白血病的80%和儿童期全部癌症的25%；在成人中，约占急性白血病的20%。

临床上急性白血病的治疗都需要足量的符合要求的造血细胞，为得到治疗所需要的细胞数量，许多科学家都试图通过体外培养来获得红细胞，主要是通过加入各种细胞因子等，但是目前所采用的方法扩增造血细胞的数量有限，而且得到的造血细胞纯度不高。

造血干细胞(hematopoietic stem cell，HSC)是一种能够分化产生各种血细胞和免疫细胞的细胞，它是当前应用于细胞疗法最多的一类细胞。应用于患有白血病、再生障碍性贫血、重症免疫缺陷征、地中海贫血、急性放射病、恶性实体瘤或者淋巴瘤等造血及免疫系统功能障碍性疾病的患者，它能够发挥功能，重建患者体内的造血功能和免疫系统，提高生存率，从而达到治疗的目的，这就是造血干细胞移植疗法，干细胞移植是当前治疗恶性血液疾病和免疫疾病的最佳手段。目前用于移植的造血干细胞主要有三种来源：骨髓、外周血和脐带血，由于这些组织中造血干细胞含量稀少以及移植排斥等问题的存在，导致90%以上的潜在患者缺乏合适配型的造血干细胞。另外体内来源的造血干细胞在体外培养一段时间后，其治疗功效也会大打折扣。而胚胎干细胞来源的造血干细胞，经体外实验和动物模型实验，已充分证明具有进一步分化为红系细胞、髓系细胞以及淋巴系细胞的潜能，是治疗造血及免疫系统功能障碍性疾病前景看好的细胞来源。研究胚胎干细胞分化为造血干细胞，不仅可作为研究动物的早期造血发生的模型，而且可以增加造血干细胞的来源，并且没有免疫排斥反应。不需要通过基因剔除、治疗性克隆等方法来解决移植排斥的问题，从而为造血干细胞移植的发展扫除了障碍，因此有着重要的研究价值和应用前景。本发明为一种最新型高效的胚胎干细胞分化为造血干细胞的方法，对急性淋巴样白血病的治疗有显著功效。

发明内容

本发明的目的是提供一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂，本发明还提供了一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂的制备方法。本发明利用人胚胎干细胞诱导生成的造血干细胞制剂通过静脉输注方式移植给急性淋巴样白血病病人，能明显改善急性淋巴样白血病病人的生存率，修复和替换受损细胞，增强代谢功能；具有修复造血微环境，促进白血病病理上恢复，为临床治疗白血病开辟细胞治疗的新途径。

为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本发明通过以下技术方案实现：一种治疗急性淋巴样白血病的干细胞制剂是由人胚胎干细胞来源的造血干细胞与以浓度比为1-5的血清白蛋白的生理盐水或者将造血干细胞附在与微载体的溶液，优选所述的载体为脂质载体、微胶囊、微球等载体配制而成的。