[发明专利]一种抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其是涉及一种抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂。

背景技术

阴道炎是妇科门诊常见的疾病，其中最常见的是霉菌性阴道炎，由念珠菌感染所致。念珠菌感染最常见的症状是白带多，外阴及阴道灼热瘙痒，外因性排尿困难，典型的白带呈凝乳状或为片块状，阴道粘膜高度红肿，可见白色鹅口疮样斑块附着，易剥离，其下为受损粘膜的糜烂基底，或形成浅溃疡，严重者可遗留瘀斑。妊娠期霉菌性阴道炎的瘙痒症状尤为严重，甚至坐卧不宁，痛苦异常，也可有尿频、尿痛等症状。念珠菌性阴道炎的治疗方法包括：局部用药，使用咪康唑栓剂、克霉唑栓剂、制霉菌素栓剂；全身用药（反复发作或不能阴道给药的患者）使用氟康唑、伊曲康唑、酮康唑。这些药物多有副作用，还会抑制阴道内正常菌群活性从而破坏阴道内正常的生态平衡。不适合妊娠期治疗，也不能用于预防。

发明内容

为了克服这些问题，本发明公开了一种抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂，能抑制阴道内细菌及念珠菌，适合于预防和早期阴道炎的治疗。

本发明涉及一种抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂，一种抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂，所述复合抑菌剂的有效活性组份由蛋黄免疫球蛋白IgY、壳聚糖和三氯生组成。

所述复合抑菌剂中，蛋黄免疫球蛋白IgY的含量按抗体效价计为100-50000滴度，壳聚糖的含量按重量计为0.01%-1%，三氯生的含量按重量计为0.001%-1%。更优选地，所述蛋黄免疫球蛋白IgY的含量按抗体效价计为1000-10000滴度，所述壳聚糖的含量按重量计为0.1%-0.5%，所述三氯生的含量按重量计为0.01%-0.1%。

所述复合抑菌剂的其它组分包括弱酸盐缓冲液、聚乙二醇和香精。

所述弱酸盐缓冲液的浓度为5-200mM、pH为3-6.5，聚乙二醇的含量按重量计为1%-20%，香精的含量按重量计为0.001%-0.5%。

更优选地，所述弱酸盐缓冲液的pH为3.5-5。

所述蛋黄免疫球蛋白IgY的制备方法如下：

（1）抗原制备：将经裂解灭活的病原体与大豆油及大豆磷脂按2：1:0.8 的质量比例混合后用超声波乳化制得抗原乳化液，备用；所述的病原体为白色念珠菌、嗜血杆菌、棒状杆菌、加特纳菌中的任一种或两种以上组合。

（2）蛋黄免疫球蛋白IgY抗体制备：用抗原乳化液免疫母鸡，收集鸡蛋，分离出蛋黄；根据蛋黄重量加1-10倍量的0.1-10%甘露醇水溶液稀释蛋黄，离心，收集含抗体的上清液，纯化抗体，用PBS缓冲液调整纯化抗体效价，分装、储存，备用。

上述原料中采用的菌种可以由本领域技术人员通过常规的菌种分离、鉴定方法获得，也可通过商业渠道，如中国微生物菌种网-北京北纳创联生物技术研究院获得。本发明所述的菌液均为通过单菌种纯化培养后获得的培养液。

本发明还提供了一种所述抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂的制备方法，其特征在于：先混合蛋黄免疫球蛋白IgY和聚乙二醇溶液，然后加入弱酸盐缓冲液混匀，再加入壳聚糖溶液混匀，然后再加入三氯生溶液，混匀，最后加入香精混匀，经0.2μ-0.45μ滤膜过滤后分装。

本发明还保护了所述的抗阴道感染免疫球蛋白复合抑菌剂在制备治疗阴道炎的药物中的应用。

本发明的免疫球蛋白复合抑菌剂是一种温和的免疫增强剂和抗菌剂，能抑制阴道内细菌及念珠菌而不破坏阴道内正常菌群的生态平衡，还可防止阴道干涩，没有副作用，适合于预防和早期阴道炎的治疗。

具体实施方式

实施例1: 抗菌免疫球蛋白制备例：

1）抗原制备：分别将白色念珠菌培养液和加特纳菌培养液于90℃保温10分钟灭活后，用超声波破碎后各取5ml混合得10ml组合菌液，加入大豆油5ml和大豆磷脂按4ml混合后用超声波搅打2分钟，便制得组合抗原乳化液，备用。

2）鸡蛋抗体制备：用1）中所制备的抗原乳化液免疫母鸡（皮下注射），每只每次注射0.3ml，每隔12天注射一次，注射5次后开始收集鸡蛋，随后每隔1个月再补充注射一次）；将收集来的鸡蛋分离出蛋黄，根据蛋黄重量，用加5倍体积量的0.2%甘露醇水溶液稀释蛋黄、搅浑后静止离心，收集含抗体的上清液；将该上清液加到经上样缓冲液平衡的DEAE离子树脂柱，依次用不同浓度（从低到高）的NaCl缓冲液洗脱柱子，收集0.5-0.8mM的NaCl洗脱的IgY抗体流分；用PBS缓冲液调纯化抗体效价至1000-5000滴度或以上，分装、低温储存，备用。

实施例2:一种免疫球蛋白复合抑菌剂I配方，制备方法及使用方法。