[发明专利]一种用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法

权利要求书

1.一种用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

(1)将淀粉与低浓度戊二醛溶液混合并充分交联反应得到醛基化淀粉胶溶液；将所得醛基化淀粉胶溶液与低浓度海藻酸钠溶液混合，得到海藻酸钠-淀粉胶凝胶；

(2)取所得海藻酸钠-淀粉胶凝胶均匀地涂到2张聚碳酸酯微孔膜上，然后将乳酸菌干粉放置于其中一张所述聚碳酸酯微孔膜的圆心上，制成三明治结构的核微孔膜；

(3)将上述核微孔膜浸入CaCl₂溶液中10s后取出，使海藻酸钠与CaCl₂反应形成稳定的螯合物，从而使海藻酸钠溶液凝胶化成良好的固定剂，得到测定膜，最后，将测定膜固定在预处理后的玻碳电极头的表面，使得乳酸菌与表征完的电极芯重合，得到生物传感电极；

(4)将上述生物传感电极浸入MRS培养基中，使乳酸菌与培养基完全接触，然后于37℃恒温培养24h，使乳酸菌活化，得到用于测定抗生素的电化学生物传感器。

2.根据权利要求1所述的用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述醛基化淀粉胶溶液通过下述方法得到：将可溶性淀粉溶解于体积百分比浓度为1％的戊二醛溶液中，80℃水浴加热并搅拌30min，配成质量浓度为1％的淀粉溶液，室温放置12小时以上，使淀粉与戊二醛充分交联得到醛基化淀粉胶溶液。

3.根据权利要求1所述的用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，与所述醛基化淀粉胶溶液混合的海藻酸钠溶液的质量浓度为2％，所述醛基化淀粉胶溶液与质量浓度为2％的海藻酸钠溶液按体积比为1:1混合。

4.根据权利要求1所述的用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，每张所述聚碳酸酯微孔膜上海藻酸钠-淀粉胶凝胶的用量为20ul，每张所述聚碳酸酯微孔膜的直径为5cm、孔径为0.22um，每张所述测定膜上乳酸菌干粉的量为0.1～0.01g。

5.根据权利要求1所述的用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述CaCl₂溶液的质量分数为5％。

6.根据权利要求1所述的用于测定抗生素的电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，所述玻碳电极的预处理方法为：将玻碳电极依次分别用1.0μm、0.3μm、0.05μm粒径的α-Al₂O₃浆在麂皮上抛光三次，且每次抛光后在超声水浴中清洗30s，最后依次用1∶1的HNO₃、无水乙醇、超纯水清洗；在1mol/L H₂SO₄溶液中用扫描范围为1.0～－1.0V，扫描速度为100mV/s的循环伏安法活化电极，重复扫描直至出现稳定的循环伏安曲线；上述的稳定的循环伏安曲线满足下述要求：在实验室条件下预处理后的电极的循环伏安曲线的峰电位差应在80mV以下，并尽可能的接近64mV，电极方能使用，最后置于氮气环境中干燥待用。