[发明专利]检测异位妊娠的方法

说明书

发明领域

本发明涉及测定异位妊娠和自发流产的可能性的方法，所述方法通过测量已发现表征这些病症的标志物水平来实现。

背景技术

异位妊娠是英国和北美的早期妊娠中母体致死的主要原因，死亡仅次于卵管破裂或间质破裂。虽然原因是产妇循环衰竭，但介入迟缓和误诊却是临床原因。因此，在破裂前较早准确诊断极其重要。

当前，异位妊娠的诊断基于阴道超声和定量血清测量人绒膜促性腺激素(hCG)。日渐灵敏的超声和hCG试验对诊断大多数女性的异位妊娠而言都有效，并且降低了对较侵入性的诊断腹腔镜的需求。然而，诊断问题仍然存在于这些已经建立的方法中，并且在40-50％的案例中在表征(at presentat ion)时做出的诊断是不正确的。若阴道超声显示附属器区域的空子宫和妊娠囊，则可能为异位妊娠；然而，对妊娠囊的观察依赖于尺寸并因此依赖于年龄，需要最小尺寸5-6mm。因此，非常早期的异位妊娠会被漏掉。hCG区分区域是血清hCG的阈值水平，当前为1000–1500IU/mL，预期在该处时妊娠囊在超声上能被可靠的观察到。在该阈值之上，若阴道超声发现具有附属肿块的空子宫则强烈提示异位妊娠。然而，该结果可能是非结论性的，需要数天的重复随访，这期间存在长期的卵管破裂风险。当阴道超声是非结论性时，对血清hCG的系列测量成为诊断的主流，其基于血清hCG在48小时内不同的翻倍率。该方法的差异边界似乎较模糊，对异位妊娠的不同翻倍率为48小时内增加<66％，近期为48小时内增加<53％。此外，13％的异位妊娠显示出超过66％截止率的无法预料的增加—特别是在非常早期的异位妊娠中。然而，诊断迟缓期间的患者焦虑是当前诊断方案的另一缺点。这些问题一起造成对初次表征时单点诊断异位妊娠的研究需求。

人绒膜促性腺激素(hCG)是异二聚体糖基化激素，包含非共价保持在一起的α亚基(hCGα)和β亚基(hCGβ)。总hCG(hCGt)由hCG变体组成，包括完整hCG、游离β亚基(hCGβ)和高糖基化同种型(hCGh)。先前发现在区别异位妊娠和活性妊娠中，尿液hCG变体相比血清中的而言重要性更低。在区别异位妊娠和活性妊娠中，单一测量血清hCGt和hCG产生了有前景的结果。281pmol/L截止值处的血清hCGβ具有100％敏感性和79％特异性；1053pmol/L截止值处的血清hCGt具有100％敏感性和68％特异性。hCGh未包括在内，因为通常没有可用的试验。还发现hCGt和hCG都不能区分异位妊娠与自发流产(自然流产)。

孕酮是妊娠期间由保持hCG的黄体激素产生的类固醇。已显示血清孕酮在异位妊娠中相比活性妊娠更低，但建议区分截止值的范围为5至22ng/mL。

CA125是由输卵管和包括腹膜的数种组织的上皮细胞生产的蛋白质。虽然在卵巢癌中发现血清水平升高，但其主要是可能在异位妊娠期间发生的腹腔刺激或穿孔的特征。相比子宫内妊娠，在异位妊娠中发现显著低水平和高水平以及无差别的结果。

本申请提供测定异位妊娠或自发流产的可能性的方法。本发明描述了能在初次表征时检测异位妊娠的方法和算法，并克服了当前方案的延迟。此外，本发明方法可在早期妊娠期间区分异位妊娠、活性妊娠和自发流产。

人绒膜促性腺激素(hCG)是一种糖肽激素，其由胎儿胎盘的合胞滋养层产生，并且分子量为约38千道尔顿。其可通过在受精后数天内基于母体尿液中的免疫测定来检测。完整的hCG分子是异质二聚体，其包含特定的β亚基，该亚基非共价结合至α亚基，这对于其它糖蛋白是常见的。其是异质二聚化的糖蛋白激素，其具有8个糖基化位点，包含四个N-连接的寡糖和四个O-连接的寡糖。所述N-连接的寡糖通过天冬酰胺残基上的β-N-糖苷键连接至多肽链；两个在α亚基上且两个在β亚基上。他们共有相同的基础结构特点：N-乙酰基葡萄糖胺(GLcNAc)连接至天冬酰胺残基上，然后连接至另一个GLcNAc、甘露糖和甘露糖的另两个分支。这是单触角(monantennary)戊糖核心，其剩余组分保持可变。所述O-连接的寡糖由α-O-糖苷键连接至β-亚基羧基末端肽的丝氨酸残基上。

已广泛报道在正常和异常妊娠中，具有可变的单-、二-和三触角碳水化合物结构的hCG的游离β-亚基(hCGβ)具有碳水化合物异质性。