[发明专利]具有人源化的B细胞活化因子基因的非人动物

权利要求书

1.一种经遗传修饰的啮齿动物基因组，其包含用含有人BAFF基因的外显子3-6的人基因组区段对内源啮齿动物Baff基因的基因组区段的替代以形成人源化Baff基因，其中所述替代是在内源啮齿动物Baff基因座上，其中所述人源化Baff基因处于所述内源啮齿动物Baff基因座上的啮齿动物Baff启动子的控制之下，并且编码人源化Baff蛋白，所述人源化Baff蛋白包含连接至由所述啮齿动物Baff基因编码的啮齿动物BAFF蛋白的细胞内部分的由所述人BAFF基因编码的人BAFF蛋白的细胞外部分。

2.权利要求1的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠。

3.权利要求2的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中所述啮齿动物是小鼠。

4.权利要求3的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中被替代的内源小鼠Baff基因的基因组区段包含所述内源小鼠Baff基因的外显子3、4、5、6以及部分外显子7。

5.权利要求4的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中所述人源化Baff蛋白包含SEQ ID NO：5的氨基酸142至285。

6.权利要求4或5的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中所述人源化Baff基因包含所述内源小鼠Baff基因的外显子1和外显子2。

7.权利要求6的经遗传修饰的啮齿动物基因组，其中所述人源化Baff蛋白包含SEQ ID NO：7所示的氨基酸序列。

8.一种小鼠胚胎干(ES)细胞在制备用作小鼠模型的小鼠中的用途，其中所述ES细胞的基因组包含用含有人BAFF基因的外显子3-6的人基因组区段对内源小鼠Baff基因的外显子3-6和部分外显子7的替代以形成人源化Baff基因，其中所述替代是在内源小鼠Baff基因座上，其中所述人源化Baff基因处于所述内源小鼠Baff基因座上的小鼠Baff启动子的控制之下，并且编码人源化Baff蛋白，所述人源化Baff蛋白包含连接至由所述小鼠Baff基因编码的小鼠Baff蛋白的细胞内部分的由所述人BAFF基因编码的人BAFF蛋白的细胞外部分。

9.一种产生从内源Baff基因座表达人源化Baff蛋白的啮齿动物的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)用含有人BAFF基因的外显子3-6的基因组区段替代啮齿动物胚胎干(ES)细胞中的内源Baff基因座上的内源啮齿动物Baff基因的基因组区段，以在内源啮齿动物Baff基因座上形成人源化Baff基因，其中所述人源化Baff基因处于所述内源啮齿动物Baff基因座上的啮齿动物Baff启动子的控制之下，并且编码人源化Baff蛋白，所述人源化Baff蛋白包含连接至由所述啮齿动物Baff基因编码的啮齿动物BAFF蛋白的细胞内部分的由所述人BAFF基因编码的人BAFF蛋白的细胞外部分；

(b)获得在内源啮齿动物Baff基因座上包含所述人源化Baff基因的经修饰的啮齿动物ES细胞；和

(c)使用(b)的经修饰的ES细胞产生啮齿动物。

10.权利要求9的方法，其中所述啮齿动物是小鼠或大鼠。

11.权利要求9或10的方法，其中所述啮齿动物不以可检测地表达全长内源啮齿动物Baff蛋白。

12.权利要求9的方法，其中所述啮齿动物是小鼠。

13.权利要求12的方法，其中被替代的内源小鼠Baff基因的基因组区段包含所述内源小鼠Baff基因的外显子3、4、5、6以及部分外显子7。

14.权利要求13的方法，其中所述人源化Baff基因包含所述内源小鼠Baff基因的外显子1和外显子2。

15.经遗传修饰的小鼠用作小鼠模型用于评估人细胞的移植的用途，其中所述经遗传修饰的小鼠包含基因组，所述基因组包含用含有人BAFF基因的外显子3-6的人基因组区段对内源小鼠Baff基因的外显子3-6和部分外显子7的替代以形成人源化Baff基因，其中所述替代是在内源小鼠Baff基因座上，其中所述人源化Baff基因处于所述内源小鼠Baff基因座上的小鼠Baff启动子的控制之下，并且编码人源化Baff蛋白，所述人源化Baff蛋白包含连接至由所述小鼠Baff基因编码的小鼠BAFF蛋白的细胞内部分的由所述人BAFF基因编码的人BAFF蛋白的细胞外部分。

16.权利要求15的用途，其中所述人细胞是人造血干细胞。