[发明专利]细胞判定方法、细胞判定装置及细胞判定程序

说明书

本发明涉及一种细胞判定方法，其特征在于，具备下述步骤：获取细胞小块的光路长图像的获取步骤、提取所获取的光路长图像中的细胞核区域的提取步骤、比较所提取的细胞核区域的内侧的光路长及外侧的光路长的比较步骤、基于比较的结果判定细胞是否为干细胞的判定步骤。

技术领域

本发明涉及细胞判定方法、细胞判定装置及细胞判定程序。

背景技术

源于人的ES细胞、iPS细胞等干细胞具有分化为多种细胞的能力(多能性)，可在疾病的阐明及药物开发筛选、毒性试验、再生医疗等目前为止较困难的使用人细胞的大规模的药效评估及医疗中应用，从而被受注目。从这些干细胞向目标细胞进行分化诱导时的分化效率，很大程度依赖于起始材料即干细胞的状态。即，若干细胞维持多能性而不保持未分化的状态，分化诱导的效率就会降低。因此，为了将这些干细胞进行产业应用，管理干细胞的品质极为重要，需要监控干细胞，在非侵入下判定状态。

而且，这些干细胞是数千～数万个左右的干细胞粘着(接触)形成密集的细胞集团(集落)，因而通常品质的管理也以集落为单位来进行。

例如，专利文献1中公开了一种细胞解析方法，是使用由大量的细胞构成的细胞集落的光路长图像，在进行上述细胞集落的解析的细胞解析装置中的细胞解析方法，其特征在于，具备以下步骤：获取步骤，所述细胞解析装置的获取单元获取上述细胞集落的光路长图像；提取步骤，上述细胞解析装置的提取单元在该获取的光路长图像中提取与上述细胞的细胞核对应的圆形形状；比较步骤，上述细胞解析装置的比较单元将其内侧的光路长及外侧的光路长与该提取的圆形形状进行比较；解析步骤，上述细胞解析装置的解析单元基于该比较结果，进行上述细胞集落的解析。

另外，非专利文献1中记载有一种技术，作为分化细胞的CHO细胞、HeLa细胞、破骨细胞样(OC)细胞中的细胞质区域的平均光路长比核区域的平均光路长小，相对于此，集落中的各hiPS细胞的细胞质区域的平均光路长比核区域的平均光路长大，光路长之比(细胞质/核)成为用于区分hiPS细胞和其它类型的分化细胞的简单指标。

专利文献1:日本特开2012－231709号公报

非专利文献

非专利文献1:Biomedical Optics Express，Vol.3，Issue9，pp.2175－2183(2012)

发明内容

本发明要解决的课题

根据专利文献1，“光路长”为“折射率”乘以“物理厚度”所得的值(光路长＝折射率×物理厚度)，细胞核(细胞核的内侧)的折射率一般比细胞质(细胞核的外侧)的折射率低(细胞核的内侧的折射率＜细胞核的外侧的折射率)。

而且，形成集落的品质高的干细胞具有图12的形状，邻接的干细胞的距离较近，细胞核间的细胞质增厚，所以细胞核的内侧和外侧的物理厚度大致相同(细胞核的内侧的物理厚度≒细胞核的外侧的物理厚度)，关于光路长，“细胞核的内侧的光路长＜细胞核的外侧的光路长”成立。

与此相反，形成集落的品质差的干细胞中，邻接的干细胞的距离较远，细胞核间的细胞质变薄，所以细胞核的内侧的物理厚度比外侧的物理厚度厚得多(细胞核的内侧的物理厚度＞＞细胞核的外侧的物理厚度)，关于光路长，“细胞核的内侧的光路长＞细胞核的外侧的光路长”成立。

这样，专利文献1中，“细胞核的内侧的光路长＜细胞核的外侧的光路长”是否成立，由细胞核的外侧的物理厚度决定，而且，细胞核的外侧的物理厚度依赖于细胞的形状。