[发明专利]修饰的KZ144内溶素序列

说明书

本发明涉及多肽，其包含与SEQ ID NO:1的序列显示至少约90％的序列同一性的氨基酸序列。所述多肽优选地降解革兰氏阴性细菌，特别是假单胞菌属和/或弯曲杆菌属细菌的肽聚糖。此外，本发明涉及编码这类多肽的核酸，包含这类核酸的载体，和相应的宿主细胞。最后，本发明涉及包含根据本发明的这类多肽、核酸、载体和/或宿主细胞的组合物。

本发明涉及多肽，其包含与SEQ ID NO:1的序列显示至少约90％的序列同一性的氨基酸序列。所述多肽优选地降解革兰氏阴性细菌，特别是假单胞菌属(Pseudomonas)和/或弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的肽聚糖。此外，本发明涉及编码这样的多肽的核酸，包含这样的核酸的载体，和相应的宿主细胞。最后，本发明涉及包含根据本发明的此类多肽、核酸、载体和/或宿主细胞的组合物。

巨大的裂解性肌尾噬菌体科噬菌体(giant,lytic Myoviridae bacteriophage)φKZ(280 334bp)会感染铜绿假单胞菌，感染铜绿假单胞菌是一种重要的机会院内病原体，对很多常用的抗生素具有耐药性，因此在医院环境中造成了相当大的担忧。2007年，Briers等人(Molecular Microbiology(2007)65(5),1334–1344)对所述噬菌体的基因组进行了测序，并鉴定了内溶素KZ144，一种高度裂解性的肽聚糖水解酶。WO 2010/149792中提出了利用包含所述内溶素序列作为酶促元件的融合蛋白来降解革兰氏阴性细菌的细胞壁。

尽管所述内溶素和融合蛋白一般而言是有效的，但事实证明，对于一些技术应用，该内溶素多肽表现出差强人意的特征，特别是在稳定性和加工方面。因此，在本领域中需要在这个方面显示出优选改进的特性的更多内溶素酶。因此，本发明的问题就是提供这样的多肽。

这个问题被附加权利要求中记载的主题所解决。

下面将给出附图的简要描述。附图的目的是更加详细地图示本发明。然而，它们并不意图在任何程度上对本发明的主题内容构成限制。

图1：图示了：

SEQ ID NO:1,

SEQ ID NO:2 没有N端甲硫氨酸的KZ144内溶素，

SEQ ID NO:3 没有N端甲硫氨酸、并且以硒代甲硫氨酸残基代替

了甲硫氨酸残基的KZ144内溶素,

SEQ ID NO:4 具有E115A突变并且没有N端甲硫氨酸的KZ144

内溶素，和

SEQ ID NO:5 KZ144内溶素。

图2：图示了：

SEQ ID NO:136 SMAP-29的融合蛋白(用实下划线标出；SEQ ID NO:

76)，修饰的KZ144，没有N端甲硫氨酸并具有C14S

和C50S(用半点/半实下划线标出；SEQ ID NO:28)

和His-标签(用点下划线标出；SEQ ID NO:135)。

SEQ ID NO:137 SMAP-29的融合蛋白(用实下划线标出；SEQ ID NO:

76),修饰的KZ144，没有N端甲硫氨酸并具有T82I,

A206V和S232T(用半点/半实下划线标出；SEQ ID

NO:29)和His-标签(用点下划线标出；SEQ ID NO: