[发明专利]用于基因治疗神经疾病的AAV-5假型载体

权利要求书

1.在哺乳动物对象中用作药物的腺相关病毒(AAV)基因治疗载体，其中所述基因治疗载体包含AAV血清型5衣壳蛋白及侧翼是AAVITR的感兴趣的基因产物，并且其中所述基因治疗载体通过腰椎鞘内施用而施用。

2.权利要求1的AAV基因治疗载体，其中腰椎鞘内施用位于选自L4–L5、L3–L4、L1–L2和L2–L3的部位。

3.权利要求1或2的AAV基因治疗载体，其中所述AAV基因治疗载体是单链AAV基因治疗载体或者单体双链载体。

4.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述感兴趣的基因产物用于治疗或预防选自如下的病症：肌萎缩性侧索硬化(ALS)，脊髓性肌萎缩(SMA)，疼痛，亨廷顿病，阿尔兹海默病，Tay-Says病，弗里德赖希共济失调，共济失调性毛细血管扩张症，1型、2型和3型脊髓小脑性共济失调，A型、B型和C型尼曼皮克病，多巴反应性肌张力障碍，脆性X综合征，克拉伯病，2型糖原贮积症(Pompe)，原发性脊髓侧索硬化，佩利措伊斯-梅茨巴赫病，X连锁肾上腺脑白质营养不良，巨轴索神经病，多系统萎缩(MSA)，近位肌强直肌病，神经元蜡样脂褐质沉积症(Batten病)和癌症。

5.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述AAVITR是AAV血清型2ITR。

6.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述感兴趣的基因产物选自：天冬氨酰氨基葡糖苷酶，α-半乳糖苷酶A，棕榈酰蛋白质硫酯酶，三肽基肽酶，溶酶体跨膜蛋白，多基因产物，半胱氨酸转运蛋白，酸性神经酰胺酶，酸性α-L-岩藻糖苷酶，保护蛋白/组织蛋白酶A，酸性β-葡糖苷酶，或者葡糖脑苷酯酶，酸性β-半乳糖苷酶，艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶，α-L-艾杜糖苷酸酶，半乳糖脑苷酯酶，酸性α-甘露糖苷酶，酸性β-甘露糖苷酶，芳基硫酸酯酶B，芳基硫酸酯酶A，N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸盐硫酸酯酶，酸性β-半乳糖苷酶，N-乙酰葡糖胺-1-磷酸转移酶，酸性鞘磷脂酶，NPC-1，酸性α-葡糖苷酶，β-己糖胺酶B，乙酰肝素N-硫酸酯酶，α-N-乙酰葡糖苷酶，乙酰辅酶A：α-氨基葡糖苷N-乙酰转移酶，N-乙酰葡糖胺-6-硫酸盐硫酸酯酶，α-N-乙酰基半乳糖苷酶，α-N-乙酰基半乳糖苷酶，α-Neuramidase，β-葡糖醛酸糖苷酶，β-己糖胺酶A，酸性脂肪酶，神经营养因子如神经生长因子(NGF)、神经营养蛋白-3(NT-3)，神经营养蛋白-4/5(NT-4/5)，脑衍生神经营养因子(BDNF)，大脑多巴胺神经营养因子(CDNF)，胶质细胞系衍生性神经营养因子(GDNF)，睫状神经营养因子(CNTF)，生长因子胰岛素样生长因子(IGF-1)及用于下调缺陷基因的miRNA。

7.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述感兴趣的基因产物用于治疗或预防与运动神经元和/或DRG中的神经元相关的病症。

8.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述感兴趣的基因产物与表达控制元件可操纵地连接，所述表达控制元件包含产生所述感兴趣的基因产物的足够表达以获得治疗作用的启动子，其中所述启动子优选选自：巨细胞病毒(CMV)启动子，磷酸甘油酸酯激酶(PGK)，CAG启动子(巨细胞病毒早期增强子元件与鸡β-肌动蛋白启动子的组合)，胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)启动子，突触蛋白-1启动子，神经元特异性烯醇化酶(NSE)及可诱导启动子如基因开关或tet-操纵子衍生的启动子。

9.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述基因治疗载体在腰椎鞘内施用之前、同时或之后进一步施用到小脑延髓池中。

10.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中2×10¹³–2×10¹⁵个基因组拷贝/千克体重被施用给对象。

11.权利要求10的AAV基因治疗载体，其中8×10¹³–6×10¹⁴个基因组拷贝/千克体重被施用给对象。

12.前述任一项权利要求的AAV基因治疗载体，其中所述对象不接受物质预处理，所述物质控制颅内压和/或可以破坏CNS微脉管系统的内皮细胞之间的细胞间紧密连接和/或促进药物如化疗药物递送至CNS。