[发明专利]膜囊泡回收设备、膜囊泡回收方法及膜囊泡分析方法

说明书

本发明的膜囊泡回收设备具备液性的填充物和具有将所述填充物的外周的至少一部分覆盖的脂质双分子层的融合膜，通过膜囊泡与所述融合膜发生融合，将所述膜囊泡的内容物混合在所述填充物中。

技术领域

本发明涉及与在生物学、生化学、生物工学、医学及医疗领域中的膜 囊泡体的分离及其分析有关的器具及方法。

本申请基于2013年10月25日于日本提出的特愿2013-222751号主张 优先权，将其内容援引于此。

背景技术

一直以来，在细胞、细胞小器官等生物体来源的膜囊泡、人工的膜囊 泡等被脂质双分子层覆盖的结构体中，对该结构体的内容物或者保持在脂 质双分子层上的物质等进行了分析。

近年来，作为细胞间信息传递的方法，利用作为具有脂质双分子层的 囊泡的外泌体的方法倍受关注。

外泌体是已知内部包含蛋白质、mRNA、微小RNA(miRNA)、DNA 等、通过在细胞间移动而能够将信息传递至移动目的地细胞的膜囊泡。例 如，在接受有含有癌细胞来源的小RNA的外泌体的细胞中，已知免疫功能 会活化或者会获得转移能力。

外泌体中除了包含释放出了外泌体的细胞所保持的遗传信息等信号因 子之外，还包含能够控制接受有该外泌体的其他细胞的功能的因子。因此， 认为外泌体能够作为用于诊断疾病的新型生物标记物源来进行有效利用。

例如，专利文献1、3中公开了对外泌体内的miRNA进行分析来对癌 或不良的妊娠结局进行诊断。

专利文献2中公开了为了决定利用siRNA(small interfering RNA，小 干涉RNA)或miRNA药物的治疗效率而对各RNA进行测定。

专利文献4中公开了对成为出现心血管系病症的风险指标的蛋白质标 记物进行检测。

专利文献5中公开了对免疫反应性的自身抗体水平进行测定来对癌或 不孕症等与自身抗体产生有关的疾病进行诊断。

专利文献6中公开了通过测定尿中外泌体的水通道蛋白1来检测囊泡 体应激反应和与该反应有关的肾疾病。

外泌体可以通过从能够含有外泌体的试样中利用超离心分离或密度梯 度超离心分离等利用密度差的分离来进行分离、制备。另外，利用专利文 献7或专利文献8所记载的方法也可进行外泌体的分离。另外，市售有对 外泌体进行分离精制的试剂盒(例如SystemBiosciences公司的ExoQuick、 Life、或Technologies公司的Total Exosome Isolation等)。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2013-102768号公报

专利文献2：日本特表2011-524164号公报

专利文献3：日本特表2010-534480号公报

专利文献4：日本特表2013-516619号公报

专利文献5：日本特表2010-517048号公报

专利文献6：日本特开2013-7698号公报

专利文献7：日本特表2003-531864号公报

专利文献8：日本特表2002-535665号公报

发明内容

发明要解决的技术问题

例如当利用离心分离对外泌体进行分离时，不能避免外泌体以外的夹 杂物混入到所分离出的外泌体中，分析精度及重现性的提高有限。