[发明专利]一种黄腐酚的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从萃取后的废啤酒花、啤酒花植物颗粒或啤酒花中提取高纯度的黄腐酚的方法。所获得的黄腐酚的纯度高，可直接应用于膳食补充剂，饮料及作为治疗产品原料。

背景技术

黄腐酚（Xn）或((E)-1-[2,4-二羟基-6-甲氧基-3-(3-甲基丁-2-烯基） - 苯基] -3-（4-羟基苯基） - 丙-2-烯-1-酮） ((E)-1-[2,4-dihydroxy-6-methoxy-3-(3-methylbut-2-enyl)-phenyl]-3-(4-hydroxyphenyl)-prop-2-en-1-one) 是异戊二烯化查耳酮类的天然产物，它主要来源于啤酒花（Humulus Lupus (hop))的雌花序。它仅微量存在于啤酒中。该化合物包含α，β不饱和羰基连接的两个苯环：

该分子中存在游离羟基，很容易异构化成一种黄酮生物合成的中间体——黄烷酮。相对于啤酒花的其他成分，黄腐酚更亲脂，因其结构中存在异戊二烯取代基。应当注意的是，在活的生物系统中，异戊二烯化的（法尼基或香叶基香叶基）结构单元能够促进许多细胞内分子附着于细胞膜中，这决定了其相应的活性。同理，在黄腐酚中，这种结构单元显著调节了该化合物的生物活性，更重要的是，影响了它的物理化学特性和亚细胞分布。

体外和体内研究还显示，黄腐酚通过许多机理减少了炎症和氧化过程。其中一个很重要的过程是：消除氧自由基及其活性形式（RTF），抑制环氧合酶（COX I和COX II）的活性，减少前列腺素，NO，TNFα，NFkB的产生和中和膜磷脂（membrane phospholipide）的过氧化。

黄腐酚的抗氧化和抗炎活性与其分子中的羟基和异戊烯基取代基相关。α，β - 不饱和羰基基团也很重要。该基团参与生物学上重要的亲核试剂的迈克加成反应，例如：蛋白质的L-半胱氨酸和其它含巯基的分子，所获得的共价加成物使得与黄腐酚结合的各种分子丧失生物活性。

黄腐酚的广谱活性可能来自其与重要的生物分子的结合能力。最典型的案例为黄腐酚对聚合酶α合成酶，拓扑异构酶I，碱性磷酸酶，芳香酶，二酰基甘油酰基转移酶，MAPK信号通路蛋白，FAK激酶，Akt和STAT或NF-kB转录因子的影响。XN诱导的所述蛋白质的活性的降低引起细胞多效性，如肿瘤细胞的增殖，细胞循环，粘附和迁移干扰。

值得注意的还有涉及神经保护属性的信息。在MCAO引起的局灶性脑缺血大鼠模型中，即体内局灶性脑缺血模型中，黄腐酚显著减少脑缺血性坏死区。因此黄腐酚也被认为减小了由β淀粉样肽（Aβ）引起的神经毒性作用。 已知Aβ介导是自由基机理，这也是阿尔茨海默氏病的主要成因之一，其机理是通过增加自由基的产生和神经细胞脂质过氧化，导致它们的细胞凋亡。

另外，除了对受体的作用，黄腐酚的活性的机制还和其对脂质膜的选择活性相关。黄腐酚与模型脂膜的互动机制的研究显示，主要作用在于其对细胞膜的动力学及膜结构的重大修改。即使极低浓度的黄腐酚也能强烈作用于脂质膜的亲水片段，引起双层膜的厚度的变化。已知新烟碱类，由于疏水性高，能很容易地穿透脂膜，黄腐酚与脂膜的相互作用能显著降低新烟碱类的穿透性，这解释了除了其对尼古丁受体的阻断作用外的强大的活性。

就其化学结构而言，黄腐酚为多酚结构，然而，与多酚不同的是，其几乎不溶于热水，但易溶于醇类或醇类和水的混合溶剂中。

提取后的啤酒花是黄腐酚的良好来源，包括酿造业和啤酒生产业产生的酒花浸膏的废料。提取后的废啤酒花中包含的黄腐酚估计高达1％，具体取决于啤酒花植物的种属。

现有技术中，黄腐酚的制备技术众多。专利DE19939350 A1公开了一种富含黄腐酚的啤酒花提取物的制备方法，所述专利中，使用水和乙醇的混合溶剂为提取溶剂。所得的提取物含5- 15％的黄腐酚。

专利EP 1 424 385 B1公开了一种以压缩的CO₂为溶剂从含黄腐酚生料中提取黄腐酚的方法，该方法需要高于500bar的压力及高于60℃的温度。

中国专利CN 101440029公开了一种从啤酒花植物及含黄腐酚的产品中提取黄腐酚的方法。该方法使用有机溶剂辅以超声波萃取，之后与硅藻土混合，过滤，以水和甲醇混合溶剂洗出，浓缩，沉淀及干燥，得到86％纯度的的黄腐酚。