[发明专利]多特异性抗体、多特异性可活化抗体及其使用方法

权利要求书

1.在活化状态下结合两种或更多种靶标或者两种或更多种表位或者其组合的多特异性可活化抗体，所述多特异性可活化抗体包含：

特异性地结合第一靶标或表位的至少抗体AB1；其中AB1包括含重链和轻链的IgG抗体；

特异性地结合第二靶标或表位的至少scFvAB2；其中AB2融合到AB1的每条重链的氨基端；

当所述多特异性可活化抗体在未裂解状态下时抑制AB1与其靶标的结合的与AB1偶联的至少第一掩蔽部分MM1；

与AB1偶联的至少第一可裂解部分CM1，其中CM1是起第一蛋白酶的底物作用的多肽，其中CM1连接到MM1；

当所述多特异性可活化抗体在未裂解状态下时抑制AB2与其靶标的结合的与AB2偶联的至少第二掩蔽部分MM2；和

与AB2偶联的至少第二可裂解部分CM2，其中CM2是起第二蛋白酶的底物作用的多肽，其中CM2连接到MM2，

其中MM1具有以下的特征：

(a) CM1位于所述可活化抗体中，使得在未裂解状态下MM1干扰AB1与第一靶标或第一表位的特异性结合；

(b) 当所述多特异性可活化抗体在裂解状态下MM1不干扰或竞争AB1与第一靶标的结合；

(c) MM1多肽序列与第一靶标的序列不同；

(d) MM1多肽序列与AB1的任何天然的结合配偶体具有不超过50%的同一性；和

(e) MM1是不超过40个氨基酸长度的多肽；

其中MM2具有以下的特征：

(a) CM2位于所述可活化抗体中，使得在未裂解状态下MM2干扰AB2与第二靶标或第二表位的特异性结合；

(b) 当所述多特异性可活化抗体在裂解状态下MM2不干扰或竞争AB2与第二靶标的结合；

(c) MM2多肽序列与第二靶标的序列不同；

(d)MM2多肽序列与AB2的任何天然的结合配偶体具有不超过50%的同一性；和

(e) MM2是不超过40个氨基酸长度的多肽，和

其中所述裂解CM1的蛋白酶与第一靶标或表位在组织中共定位，和其中当所述多特异性可活化抗体暴露于所述蛋白酶时所述蛋白酶裂解多特异性可活化抗体中的CM1；和

其中当所述多特异性可活化抗体暴露于第二蛋白酶时所述第二蛋白酶裂解多特异性可活化抗体中的CM2。

2.权利要求1的多特异性可活化抗体，其中在未裂解状态下多特异性可活化抗体的至少一部分具有如下的从N-端至C-端的结构排列：MM1-CM1-AB1或AB1-CM1-MM1。

3.权利要求1的多特异性可活化抗体，其中所述多特异性可活化抗体包含：

在MM1和CM1之间的连接肽；或

在CM1和AB1之间的连接肽；或

第一连接肽(LP1)和第二连接肽(LP2)，其中在未裂解状态下所述多特异性可活化抗体具有如下的从N-端至C-端的结构排列：MM1-LP1-CM1-LP2-AB1或AB1-LP2-CM1-LP1-MM1。

4.权利要求3的多特异性可活化抗体，其中两个连接肽不需要彼此相同。

5.权利要求3的多特异性可活化抗体，其中LP1和LP2各自是1-20个氨基酸长度的肽。

6.权利要求1的多特异性可活化抗体，其中CM1是至多15个氨基酸长度的多肽。

7.权利要求1的多特异性可活化抗体，其中CM2是至多15个氨基酸长度的多肽。

8.权利要求1的多特异性可活化抗体，其中所述第二蛋白酶与第二靶标或表位在组织中共定位，和其中当所述多特异性可活化抗体暴露于所述第二蛋白酶时所述第二蛋白酶裂解多特异性可活化抗体中的CM2，

其中第一蛋白酶和第二蛋白酶与第一靶标或表位和第二靶标或表位在组织中共定位；和/或

其中第一蛋白酶和第二蛋白酶是相同的蛋白酶，其中CM1和CM2是相同蛋白酶的不同的底物；或

其中第一蛋白酶和第二蛋白酶是不同的蛋白酶。