[发明专利]用于紧密连接屏障调节的设计肽

说明书

根据本文例示的方面，提供一种短暂地破坏紧密连接内的claudin‑1的试剂。所述试剂包括含有至少40％的极性、不带电氨基酸残基和自组装β折叠二级结构的肽。根据本文例示的方面，还提供一种经上皮药物和疫苗制剂，以及分离肽、药物组合物和经皮递送装置。本文还描述破坏上皮屏障的方法和施用本文所述的经上皮制剂的方法。

本申请要求2013年8月16日提交的美国临时专利申请序列第61/866,818号的权益，该申请据此以引用的方式整体并入。

本发明是在授权号5 T32 AR007472-25下借助美国国家卫生研究院的支持进行的。美国政府对本发明具有一定权利。

技术领域

本文公开了适用于破坏上皮屏障的分离肽，经上皮药物或疫苗制剂，用于递送这些制剂的药物递送媒介物，以及使用这些制剂来破坏上皮屏障的方法。

背景

完整得上皮屏障(例如皮肤)对于健康至关重要，用于从身体排除外源化学物、抗原以及病原体(De Benedetto等人,“Skin Barrier Disruption:A Requirement forAllergen Sensitization？,”J.Invest.Dermatol.132:949–963(2012)；O’Neill等人,“Tight Junction Proteins and the Epidermis,”Exp.Dermatol.20:88–91(2011)；Kubo等人,“Epidermal Barrier Dysfunction and Cutaneous Sensitization in AtopicDiseases,”J.Clin.Invest.122:440–447(2012))。同样地，其妨碍治疗剂和疫苗的经皮递送。为了解决这个问题，已经进行了持续且大量的努力来开发细胞穿透肽以促进经皮递送(Milletti,“Cell-Penetrating Peptides:Classes,Origin,and Current Landscape,”Drug Discov.Today17:850–860(2012)；Stanzl等人,“Fifteen Years of Cell-Penetrating,Guanidinium-Rich Molecular Transporters:Basic Science,ResearchTools,and Clinical Applications,”Acc.Chem.Res.46(12):2944-54(2013))。虽然这种努力已经产生了许多显著成就，但一种替代策略是可逆地弱化细胞之间的相互作用，由此使得能够进行细胞旁路递送而不使用细胞穿透肽。

上皮细胞层中的细胞旁路屏障经由紧密连接(“TJ”)密封。在皮肤中，TJ形成于颗粒层(“SG”)中(Yoshida等人,“Functional Tight Junction Barrier Localizes in theSecond Layer of the Stratum Granulosum of Human Epidermis,”J.Dermatol.Sci.71(2):89-99(2013))且甚至可存留于角质层(“SC”)中(Haftek等人,“Compartmentalizationof the Human Stratum Corneum by Persistent Tight Junction-Like Structures,”Exp.Dermatol.20:617–621(2011)；Sugawara等人,“Tight Junction Dysfunction in theStratum Granulosum Leads to Aberrant Stratum Corneum Barrier Function inClaudin-1-Deficient Mice,”J.Dermatol.Sci.70(1):12-18(2013))。TJ和SC一致用于形成表皮屏障。