[发明专利]用于制备样品的方法和用于分析靶标的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于制备样品的方法和用于分析靶标的方法。

背景技术

在各种领域如临床治疗领域，食品领域，和环境领域中，存在对靶标 检测的需要，并且与靶标的相互作用通常用于检测。通常，如下地检测靶 标：例如通过使用结合靶标的第一结合物质和结合第一结合物质并且用标 记物质标记的第二结合物质。首先，使得第一结合物质与样品中的靶标结 合，并且随后使得标记的第二结合物质与结合靶标的第一结合物质结合， 从而形成靶标、第一结合物质和标记的第二结合物质的复合体。随后，通 过检测复合体中的标记的第二结合物质的标记物质，可以间接检测样品中 的靶标。

通常，使用抗体作为第一结合物质和第二结合物质，并且使用氧化还 原酶如过氧化物酶作为标记物质。然而，近些年来，提出使用结合靶标的 核酸分子和具有与酶类似的催化功能的核酸分子作为新的工具来替代抗 体和酶的方法。前一核酸分子(结合核酸分子)是所谓的适配体并且后一核 酸分子(催化核酸分子)是所谓的脱氧核酶、核酶等。这样的核酸分子可以 作为其中结合核酸分子和催化核酸分子相连的核酸元件用于检测靶标。例 如，这样的核酸分子允许例如更简单的分析和更小的分析装置。

引用列表

非专利文献

非专利文献1：Teller等人，Anal.Chem.，2009，第81卷，pp.9114-9119

发明概述

本发明要解决的问题

然而，由于以下原因，取决于样本，使用催化核酸分子检测靶标是困 难的。在样本中，例如，奶如牛奶和奶制品如奶粉等含有作为污染物的蛋 白质，脂质和抑制催化核酸分子的催化功能的抑制剂。因此，为了使用催 化核酸分子进行所述检测方法，需要通过向其应用预处理来从样本中去除 污染物以制备要进行分析的样品。例如，需要使用有机溶剂的凝结处理来 去除污染物如蛋白、脂质等。然而，本发明的发明人发现，有机溶剂有时 混入使用有机溶剂制备的样品中并且由于样品中混入的有机溶剂，催化核 酸分子不起作用。因此，发现重要的是，在不需要有机溶剂的情况下向样 本施用预处理以制备在使用催化核酸分子的靶标检测中的样品。

因此，本发明意在提供用于制备要进行使用催化核酸分子而不需要有 机溶剂的靶标分析的样品的方法和使用所述样品分析靶标的方法。

解决问题的方式

本发明提供用于制备样品的方法，所述方法包括：在含有样本和阳离 子聚合物的水性混合物中将所述样本与所述阳离子聚合物接触；通过固液 分离从水性混合物中回收含有样本中的靶标的液体级分；和通过柱色谱法 使用水性溶剂从所述液体级分回收含有靶标的样品，其中所述样品是要进 行用于使用产生催化功能的催化核酸分子分析靶标的方法的样品。

本发明还提供用于分析靶标的方法，所述方法包括：将通过根据本发 明的方法制备的样品与结合靶标的第一结合物质和产生催化功能的催化 核酸分子接触，以形成样品中的靶标、第一结合物质和催化核酸分子的复 合体；和检测复合体中催化核酸分子的催化功能，从而检测样品中的靶标。

发明效果

根据本发明，可以在基本上不需要有机溶剂的情况下，通过使用在水 性混合物中的阳离子聚合物的凝结处理，使用水性溶剂的柱色谱法等，制 备要进行用于使用催化核酸分子分析靶标的方法的样品。因为，如上所述， 根据本发明制备的样品基本上不含有机溶剂，所以由有机溶剂造成的对催 化核酸分子功能的影响可以被抑制。因此，例如，对于各种领域如临床治 疗领域、食品领域和环境领域中的研究和测试，本发明非常有用。

附图简述

[图1]图1是显示本发明的实施例1中使用核酸元件的三聚氰胺分析 的反应溶液的发光强度的图。

[图2]图2是显示本发明的实施例2中通过阳离子交换色谱法的三聚 氰胺的洗脱模式的图。

[图3]图3是显示表明本发明的实施例3中三聚氰胺的检测的发光强 度的结果的图。

示例性实施方案的描述

(样品的制备方法)