[发明专利]用于梭菌转化的组合物和方法无效
| 申请号： | 201480045794.1 | 申请日： | 2014-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN105518130A | 公开（公告）日： | 2016-04-20 |
| 发明（设计）人： | M·C·斯科谢尔;D·H·韦尔斯 | 申请（专利权）人： | 丹尼斯科美国公司 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 黄革生;林柏楠 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 转化 组合 方法 | ||
1.一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸与SEQIDNO:1具有至少90％ 的序列同一性，其中所述多核苷酸编码具有甲基转移酶活性的多 肽。
2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸是SEQIDNO: 2。
3.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述所编码的多肽在包含 CCWGG的序列处使多核苷酸甲基化。
4.根据权利要求3所述的多核苷酸，其中所述包含CCWGG的序列选 自CCAGG(SEQIDNO:9)和/或CCTGG(SEQIDNO:10)。
5.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述所编码的多肽在SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10处使多核苷酸甲基化。
6.一种包含根据权利要求1-5中任一项所述的多核苷酸的质粒，所述多 核苷酸可操作地连接至一种或多种控制序列，使得所述所编码的多 肽能够在表达宿主中表达。
7.根据权利要求6所述的质粒，其中所述表达宿主是大肠杆菌(E. coli)。
8.根据权利要求6所述的质粒，其中所述质粒还包含SEQIDNO:14。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的质粒，其中所述质粒转化到大肠杆 菌(E.coli)S17-1细胞。
10.一种包含根据权利要求1-5所述的多核苷酸中的任一者的重组宿主细 胞。
11.一种包含根据权利要求5-8所述的质粒中的任一者的重组宿主细胞。
12.一种分离的多肽，所述多肽包含与SEQIDNO:3具有至少90％的序 列同一性的氨基酸序列，其中所述多肽能够在包含CCWGG的序列 处使多核苷酸甲基化。
13.根据权利要求12所述的多肽，其中所述多肽能够在包含SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10的序列处使多核苷酸甲基化。
14.根据权利要求12所述的多肽，其中所述多肽能够在SEQIDNO:9 和/或SEQIDNO:10处使多核苷酸甲基化。
15.一种分离的多肽，所述多肽包含与SEQIDNO:3具有至少90％的序 列同一性的氨基酸序列，其中所述多肽能够在包含CCWGG的序列 处使多核苷酸甲基化。
16.根据权利要求15所述的多肽，其中所述多肽能够在包含SEQID NO:9和/或SEQIDNO:10的序列处使多核苷酸甲基化。
17.根据权利要求15所述的多肽，其中所述多肽能够在SEQIDNO:9 和/或SEQIDNO:10处使多核苷酸甲基化。
18.根据权利要求15所述的多肽，其中所述多肽是SEQIDNO3。
19.一种由根据权利要求1-5所述的多核苷酸中的任一者生成的分离的多 肽，其中所述多肽具有甲基转移酶活性。
20.一种生成DNA甲基转移酶的方法，所述方法包括：(a)培养重组宿主 细胞，所述重组宿主细胞包含根据权利要求1-5中任一项所述的多核 苷酸，所述培养在合适的条件下进行，以生成所述所编码的DNA甲 基转移酶，以及(b)回收所述DNA甲基转移酶。
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