[发明专利]多肽的酶促偶联

权利要求书

1.一种使疏水性、高分子量或带电有机化合物偶联至抗体的方法，其包括以下步骤：

a)提供包含接受体谷氨酰胺残基的抗体或抗体片段；

b)使所述抗体与包含伯胺的连接试剂和所关注的部分(Z)反应，其中(Z)为疏水性化合 物、带电有机化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有机化合物，在TGase存 在下，在足以获得包含经由所述连接试剂连接至所述所关注的部分(Z)的接受体谷氨酰胺 的抗体的条件下进行，其中所述反应混合物不含有机溶剂或含有小于10％(v/v)，任选地进 一步小于5％、4％、3％或2％(v/v)的有机溶剂。

2.一种使疏水性、高分子量或带电有机化合物偶联至抗体的方法，其包括以下步骤：

a)提供在重链的位置297(EU编号)处包含谷氨酰胺残基并且在位置295(EU编号)处缺 乏接受体谷氨酰胺的抗体或抗体片段；

b)使所述抗体与包含伯胺的连接试剂和所关注的部分(Z)反应，其中(Z)为疏水性化合 物、带电有机化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有机化合物，在TGase存 在下，在足以获得包含经由所述连接试剂连接至所述所关注的部分(Z)的接受体谷氨酰胺 的抗体的条件下进行。

3.一种使疏水性、高分子量和/或带电有机化合物偶联至抗体的方法，其包括以下步 骤：

a)提供具有至少一个接受体谷氨酰胺残基的抗体；以及

b)使所述抗体与包含伯胺的连接子和反应基团(R)反应，在TGase存在下，在足以获得 包含经由所述连接子连接至反应基团(R)的接受体谷氨酰胺的抗体的条件下进行，其中所 述反应混合物不含有机溶剂或含有小于10％(v/v)或含有小于5％、4％、3％或2％(v/v)的 有机溶剂；以及

(c)在有机溶剂存在下，任选地在至少2％、3％、4％、5％或10％(v/v)的有机溶剂存在 下，使以下反应：

(i)包含经由包含伯胺的连接子连接至反应基团(R)的接受体谷氨酰胺的步骤(b)的抗 体，与

(ii)包含所关注的部分(Z)和能够与反应基团R反应的反应基团(R′)的化合物，其中 (Z)为疏水性化合物、带电有机化合物和/或具有至少500、700或800g/mol的分子量的有机 化合物，

在足以获得包含经由包含伯胺的连接子连接至所关注的部分(Z)的接受体谷氨酰胺的 抗体的条件下进行。

4.如权利要求4所述的方法，其中抗体包含人类重链和轻链恒定区，其中所述重链恒定 区包含N297Q取代和Q295X取代，其中X为除谷氨酰胺之外的任何氨基酸。

5.如权利要求1至2或4所述的方法，其中获得式IVa的抗体或组合物。

6.如权利要求3至4所述的方法，其中获得式IVb的抗体或组合物。

7.一种抗体，其通过如前述权利要求中任一项所述的方法产生。