[发明专利]分子血细胞计数

说明书

相关申请的交叉引用

本专利申请要求2013年5月28日提交的第61/827,850号美国临时申 请；2013年5月28日提交的第61/827,854号美国临时申请；和2013年5 月28日提交的第61/827,856号美国临时申请的利益，以上申请的全部内 容通过引用并入本文。

领域

本发明涉及一种用于通过分子血细胞计数进行标记的细胞分析的设 备。

介绍

质谱流式细胞技术是一种单细胞分析技术，其中用金属共轭抗体和金 属插入剂标记的细胞单独地被引入电感耦合等离子体(ICP)离子源，其中 所述细胞被蒸发、雾化和离子化用于同时进行元素分析。元素标签被从过 度金属选择，因为它们通常不存在于生物材料中。因此，可区别的标签的 数量限于可用过渡元素和相关的金属同位素的数量。然而，预期的是对满 足增加的多参数粒子分析的需求的甚至更大数量的不同的标签的需求可 以超过可获自过渡金属的元素标签的数量。

概述

基于上述和根据本教导，申请人认识到分子化合物可被设计用于标记 粒子(诸如生物细胞)和通过询问相应的完整的分子离子、它们的物理性 能，可用于区分基于分子的标签。在这种技术中，分子标签的基团(group ofmoleculartags)可从每个粒子上释放，使得每个不同的分子标签的基团 能够经历电离过程，所述电离过程保留了在它的基团内的分子离子特性。 在连续结构(successionalformation)中的每个不同的分子离子的基团 (groupofmolecularion)的流可被询问，并且在每个基团中的分子离子根 据每个分子离子的特性可以是空间上分离的。在分析器中，每个不同的分 子离子的基团的存在可由第一检测器检测，之后当在漂移管内穿行时空间 分离在每个基团中的分子离子。与第一检测器同步的第二检测器检测与每 个不同的分子离子的基团对应的分离的分子离子。分子标签可以被配置具 有不同的释放特性，使得不同的分子标签可根据释放特性而从粒子选择性 地释放。

附图

本领域技术人员将理解下面所描述的附图仅用于说明性目的。附图并 不旨在以任何方式限制申请人教导的范围。在附图中：

图1是分子血细胞计数器的示意图；

图2是显示由标记有分子标签的粒子通过根据图1所述的分子血细胞 计数器所经历的事件的分子血细胞计数的图形表示；

图3是含有来自根据本教导的第一检测器和第二检测器的信号的分析 的示例性表示；以及

图4是适合于在根据本教导的分子血细胞计数中使用的标记有分子标 签的粒子的图形表示。

各种实施方式的描述

应当理解的是，参考各种要素结合本教导使用的词语“一(a)”或“一 个(an)”包含“一个或多个”或“至少一个”，除非上下文以其它方式清 楚地指示。首先参考图1，其示出分子血细胞计数器(通常由参考数字10 指示)的示意图。分子血细胞计数器10包括样品递送系统20，样品递送 系统20耦合到电离源34，电离源34定位在分析器40的上游。样品递送 系统20可被配置具有入口节段22，其中入口节段22过渡到激活区24中。 激活区24可连接到出口节段26，其用于耦合到电离源34(通常在大气压 下进行操作)。电离源34可被定位在分析器40(如图1中示出的)附近， 使得可以从离子源出口36将分子离子连续引导进入分析器40中(如下文 将描述的)。分析器40可以具有通常描述为迁移率分离器的类型，迁移率 分离器具有包括具有耦合到离子接口46的上游节段44的漂移管42的配 置。通常，分析器40在低于大气压力的压力(约1-10托)下操作，例如 在漂移或缓冲气体存在的情况下，且离子接口46可被配置为提供从离子 源34的大气压力耦合的压差(如通常由差动泵送系统限定)。另外，分析 器40可配备有用于在分子离子的迁移率分离(mobilityseparation)前检测 它们的存在的第一检测器48和用于检测迁移率分离的分子离子的第二检 测器50。