[发明专利]呼吸道合胞病毒半活疫苗

说明书

发明领域

本发明涉及呼吸道合胞病毒(RSV)半活疫苗，其包含表达嵌合RSV/SeVF蛋白的基 因组复制缺陷型仙台病毒(SeV)载体。此外，本发明涉及用于产生本发明的基因组复制缺陷 型SeV载体的方法，及其在RSV感染和RSV感染相关疾病的治疗中的用途。

发明背景

现今使用的许多病毒疫苗(包括麻疹疫苗和一些流感疫苗)基于减毒病毒，并产生 良好和长效的预防性体液和细胞免疫应答(Amanna等人，N.Engl.J.Med.357:1903-1915， 2007)。这样的减毒活疫苗通过降低所使用病毒的毒力但仍使其保持存活(或“活的”)进行 制备。

然而，活疫苗的安全不断被讨论，因为它们还与遗传不稳定性和残留毒力相关 (Ehrenfeld等人，Expert.Rev.Vaccines8:899-905，2009)。如对于Sabin脊髓灰质炎疫苗 所见的减毒突变的可能逆转(Salk，D.和Salk，J.，Vaccine2:59-74，1984；Kew等人， Annu.Rev.Microbiol.59:587-635，2005)，或者寻找减毒的正确平衡(其例如使减毒呼吸道 合胞病毒(RSV)活疫苗的开发复杂化(Luongo等人，Vaccines27:5667-5676，2009))，例证 了活疫苗的缺陷。

考虑到使用活疫苗存在的局限性，病毒载体已作为有力和确定的方法出现，具有 与减毒活疫苗相似的免疫原性特征(Abdulhaqq等人，Immunol.Res.42:219-232，2008； Liniger等人，Vaccine27:3299-3305，2009；Zhan等人，Vaccine26:3480-3488，2008； Slobod等人，Vaccine22:3182-3186，2004)。然而，减毒活病毒载体通常面临与长期使用的 减毒活疫苗相似的安全性担忧。

在过去受到疫苗开发者显著关注的病毒组是非节段负链RNA病毒(NNSV)组。这些 病毒具有非常期望的安全特征谱，因为它们含有RNA基因组且仅在宿主细胞的细胞质中复 制，从而排除整合到宿主基因组内以引起插入诱变的任何可能性。此外，尚未观察到重组事 件(Bukreyev等人，J.Virol.80:10293-10306，2006)。NNSV包含四个科，其中弹状病毒科 (Rhabdoviridae)(例如水疱性口炎病毒(VSV)和狂犬病病毒(RV))和副粘病毒科 (Paramyxoviridae)(例如仙台病毒(SeV)和人副流感病毒(hPIV))的成员已优先用于开发 候选病毒载体疫苗(Schmidt等人，J.Virol.75:4594-4603，2001；Bukreyev等人， J.Virol.80:10293-10306，2006)。

使用NNSV作为疫苗主链，已开发了各种病毒疫苗载体候选物。例如，通过将人副流 感病毒2型(hPIV2)的HN和F蛋白(其胞质结构域替换为人副流感病毒3型(hPIV3)的相应胞 质结构域)掺入基于hPIV3的病毒载体内，来产生hPIV2/hPIV3病毒疫苗载体(Tao等人， J.Virol.74:6448-6458，2000)。此外，描述了牛/人减毒PIV3疫苗载体，其在牛PIV3(bPIV3) 主链中表达hPIV3的F蛋白(Haller等人，J.Virol.74:11626-35，2000)。还已知的是表达人 PIV3的F和NH蛋白以及人RSV的全长天然F蛋白的基于牛PIV3的疫苗候选物，其被发现在非 洲绿猴中保护不受RSV感染(Tang等人，J.Virol.79:11198-11207，2004)。