[发明专利]经由自体干细胞动员的创伤愈合

说明书

本发明涉及创伤愈合领域。更具体地，本发明提供了可用于经由自体干细胞动员改善创伤愈合的方法和组合物。在一个实施方式中，用于改善患者的创伤愈合的方法包括向所述患者施用治疗有效量的干细胞动员剂和低剂量的免疫抑制剂。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2013年11月22日提交的美国临时申请第61/907,624号以及于2013年4月29日提交的美国临时申请第61/816,827号的权益，所述美国临时申请中的每一个通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明涉及创伤愈合领域。更具体地，本发明提供了可用于经由自体干细胞动员改善创伤愈合的方法和组合物。

以电子方式提交的材料通过引用并入

本申请包含序列表。序列表已经以标题为“P12415-03_ST25.txt”的ASCII文本文件经由EFS-Web以电子方式提交。序列表的大小为2,713字节，并且创建于2014年4月24日。据此通过引用整体并入。

背景技术

在美国每年有多于125万人遭受烧伤以及650万人具有由压力、静脉淤滞或糖尿病引起的慢性皮肤溃疡(Singer and Clark，1999)。这些病况的治疗仍不完善并且费用昂贵。希望干细胞疗法可以证明是有益的，因为已经越来越明确确定的是干细胞在创伤愈合中起着重要作用。例如，已经显示，人工皮肤替代物在将干细胞掺入这些膜时更有效。烧伤愈合的质量得到改善(Leonardi等，2012)，减少了瘢痕形成并且重建皮肤附属器(Mansilla等，2010；Tamai等，2011；Huang和Burd，2012)。慢性静态糖尿病溃疡的治疗已经通过将患者的骨髓(BM)间充质干细胞(MSC)与埋入可生物降解的胶原膜(ColadermR)的自体皮肤成纤维细胞组合使用而得到改善(Vojtassak等，2006)。已经显示来自胚胎来源和出生后来源的BM细胞修复胶原合成中的遗传缺陷和基膜缺陷，从而促进皮肤创伤愈合(Chino等，2008；Tolar等，2009；Fujita等，2010)。最近，临床试验发现在患有由缺乏Col 7引起的发疱皮肤病症的人中的同种异体的全BM移植致使皮肤完整性恢复以及Col 7在基膜中表达(Wagner等，2010)。

许多基础的细胞研究也已经强调皮肤与BM之间的可塑关系。在具有造血谱系和间充质谱系的真皮中的成纤维细胞样细胞来源于BM，并且这些细胞的数目在皮肤创伤之后增加(Fathke等，2004；Ishii等，2005)。在BM移植之后，供体细胞已经替换一些角化细胞并且已经在表皮中存留至少3年(Korbling等，2002)。BM细胞有助于胎儿皮肤形成，因为将绿色荧光蛋白(GFP)BM细胞输注入小鼠的子宫中导致GFP-阳性细胞在形成的皮肤中积聚，所述皮肤特别是与形成毛囊相关的(Chino等，2008)。

这些大量的研究记录BM干细胞在创伤愈合中的重要性并且提出了令人向往的可能性：可利用细胞过程制定实用的治疗方案来治疗需要立即治疗的大量全皮层烧伤和大量软组织损伤。通过利用干细胞改善创伤修复的可能性使用NIH登记簿列出的基于MSC的疗法通过存在的90个临床试验得以证实(Cerqueira等，2012)。

为避免价格昂贵且耗时的内源干细胞的制备，我们计划在这些研究中将内源干细胞与AMD3100和他克莫司(Tacrolimus)药理动员。已经显示AMD3100能在动物和人中将来自BM的内源干细胞驱向血流。低剂量的他克莫司证明具有协同效应，组合治疗有希望成为将干细胞呈递至损害区域的简单、安全且迅速的方法。在此，我们在小鼠和大鼠中治愈全皮层皮肤创伤来检验这一假设。发现该治疗能够将完全愈合的时间减少25％，我们描绘了创伤中干细胞/祖细胞和相关细胞因子/生长因子的特性并且使用谱系示踪证实动员的CD133+干细胞在创伤区的血管生成和毛囊再生中的重要作用。

发明内容