[发明专利]烯醇脱水酶变体

权利要求书

1.烯醇脱水酶变体，其特征在于它能够以比其源自的烯醇脱水酶的活性改进的活性，将至少一种与通式C_nH_2nO相对应的烯醇化合物转化成共轭二烯C_nH_2n-2，其中3<n<7。

2.权利要求1的烯醇脱水酶变体，其中，

(i)与通式C_nH_2nO相对应的化合物是巴豆醇、丁-3-烯-2-醇或丁-3-烯-1-醇并且与通式C_nH_2n-2相对应的化合物是1,3丁二烯；或

(ii)与通式C_nH_2nO相对应的化合物是异戊烯醇、3-甲基丁-3-烯-1-醇，2-甲基-丁-3-烯-1-醇，2-甲基-丁-2-烯-1-醇，3-甲基-丁-3-烯-2-醇或2-甲基-丁-3-烯-2-醇并且与通式C_nH_2n-2相对应的化合物是异戊二烯；或

(iii)与通式C_nH_2nO相对应的化合物是2,3-二甲基-丁-2-烯-1-醇、2,3-二甲基-丁-3-烯-2-醇或2,3-二甲基-丁-3-烯-1-醇并且与通式C_nH_2n-2相对应的化合物是二甲基丁二烯。

3.烯醇脱水酶变体，其

(a)特征在于它能够以至少0.033x10^-3s^-1的巴豆醇至1,3丁二烯的转换率将巴豆醇转化成1,3丁二烯；或

(b)特征在于它能够以至少1.1x10^-4s^-1的丁-3-烯-2-醇至1,3丁二烯的转换率将丁-3-烯-2-醇转化成1,3丁二烯；或

(c)特征在于它能够以至少3.3x10^-4s^-1的异戊烯醇至异戊二烯的转换率将异戊烯醇转化成异戊二烯；或

(d)特征在于它能够以至少3.3x10^-5s^-1的3-甲基丁-3-烯-1-醇至异戊二烯的转换率将3-甲基丁-3-烯-1-醇转化成异戊二烯。

4.权利要求1至3中任一项的烯醇脱水酶变体，其中烯醇脱水酶变体的特征在于与其源自的相应序列相比，它显示一个或多个取代、缺失和/或插入并且其中这些取代、缺失和/或插入在一个或多个与SEQIDNO:1中所示氨基酸序列的位置195、116、80、106、119、357、75、132、73、199、123、68、126、159、227、367、234、192、157、169、181、156、122、84、318、389、115、76、390、255、247、50、251、158、324、281、285、98、95、186、248、72、175、245、173、310、140、18、20、170、269、382、39、77、144、168、386、12、151、230、194、207、114、108、210、70、364和10相对应的位置处出现。

5.烯醇脱水酶变体，其显示比其源自的相应烯醇脱水酶在将巴豆醇转化成1,3丁二烯中的改进的活性，其中烯醇脱水酶变体的特征在于与其源自的相应序列相比，它显示一个或多个取代、缺失和/或插入并且其中这些取代、缺失和/或插入在一个或多个与SEQIDNO:1中所示氨基酸序列的位置195、116、80、106、119、357、75、132、73、199、123、68、126、159、227、367、234、192、157、169、181、156、122、84、318、389、115、76、390、255、247、50、251、158、324、281、285、98、95、186、248、72、175、245、173、310、140、18、20、170、269、382、39、77、144、168、386、12、151、230、194、207、114、108、210、70、364和10相对应的位置处出现。