[发明专利]用于分析血液以检测与异常蛋白质聚集相关的疾病的方法

说明书

相关申请

本申请要求于2013年03月15日提交的美国专利申请第13/833008号的优先权，其内容以引用方式全文并入于此作为参考。

技术领域

本公开涉及用于分析血液以检测与异常蛋白质聚集相关的疾病的方法。在一个实施方案中，所述与异常蛋白质聚集相关的疾病是阿尔茨海默氏病。

背景技术

阿尔茨海默氏病(AD)是老年人口痴呆的最常见原因，全世界超过3500万人受到影响，且若不开发出有效的疗法，到2050年受影响人口预计将上升至1亿1500万(Barnes和Yaffe 2011)。这种年龄相关的神经变性病症以淀粉样蛋白β(Aβ)(包括脑中的老年斑块、神经原纤维缠结和突触丢失)为病理特征(Selkoe 2001)。虽然AD是一种变性病症是明确的，但免疫系统的作用也是突出的(由Britschgi和Wyss-Coray综述，2007)。在AD中，有毒的Aβ肽聚集成更高分子量的组装体，且不仅在细胞外间隙，也在脑中的血管壁上蓄积(de la Torre 2002；Deane与Zlokovic 2007)，增加它们的通透性(Nagababu等人，2009)，并促进将T淋巴细胞转运至脑中(Farkas等人，2003)。巨噬细胞/小神经胶质细胞吸收Aβ，且为Aβ清除的关键因素(Majumdar等人，2008；Mildner等人，2007；Simard等人，2006)。嗜中性粒细胞也通过血脑屏障破坏渗入AD脑中(Stamatovic等人，2005)。

尽管付出了相当大的努力，但是既没有对于AD的治疗，甚至也没有用于可靠地建立确定的诊断的临床试验；脑组织的死后检查是目前确认AD诊断的唯一确定方法。实际上，目前的诊断标准将“可能的AD”作为具有最高确定度的类别(McKhann等人，2011)，这反映出死后诊断的局限。简单和可靠的试验基于下述几个原因将会是重要的：如果入组的个体具有明确的诊断，治疗性试验将会更可靠，使得能够研究更多的同质群体。一旦这个成为可能，较轻的痴呆(轻度认知缺损)病例(其还未达到对于AD的诊断标准)，能被正确地分类为其他原因(例如，血管的)的早期AD，使合适的治疗能得到更好的预测及建立。

从人口健康角度，考虑到AD脑中的生物化学变化(例如淀粉样蛋白沉积)开始于出现临床症状的几年前到也许数十年前，当可行时，检测早期临床前疾病并建立预防措施是可能的。因此，随着发达国家准备开始应对AD不可避免的流行，对于AD便宜的、非侵入性的及快速的检验是至关重要的。

对于发展生物标记以支持AD诊断，人们已做出了大量的努力。在血液中，焦点集中于测定血浆中的Aβ水平。这并未被证实是可靠的，因为Aβ40、Aβ42的水平或二者的比率不能可靠地区分健康对照和AD患者(Thambisety与Lovestone 2010)。其他方式包括血浆的蛋白质组学分析，但是它是昂贵的、复杂的，无法经受高通量分析的考验且仍需实验的。Aβ的CSF分析及(磷酸化的)微观相关(tau)水平具有更强的预测价值(van Rossum等人，2012；Senanaron等人，2012)，但与血液相比其是侵入性的，不太可能成为正式研究试验外的常规方法。成像标记(MRI、fMRI、FDG-PET、淀粉样蛋白-PET)(Jack 2012；Matsuda和Imabayashi 2012)全都更昂贵，不是普遍可用的，且要么是非特异的(MRI)要么是高度专业化的，只在几个中枢(center)可用(例如，淀粉样蛋白-PET)。因此，用于诊断AD和将发展为AD的AD相关的轻度认知缺损的简单且便宜的血液检测是高度值得期望的。人血小样品中进行检测的能力将是对目前方法的巨大改进，并为发展简单、快速高通量筛选方法铺平道路。这样的方法也适用于于其他以异常蛋白质聚集为特征的疾病。

发明内容