[发明专利]用于分离核酸的系统和方法在审
| 申请号: | 201480027356.2 | 申请日: | 2014-03-13 |
| 公开(公告)号: | CN105378108A | 公开(公告)日: | 2016-03-02 |
| 发明(设计)人: | G.冈林;R.科瓦尔;E.格拉纳多斯;N.所罗门;W-B.马;M.索斯塔克 | 申请(专利权)人: | 雅培分子公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 初明明;彭昶 |
| 地址: | 美国伊*** | 国省代码: | 美国;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 分离 核酸 系统 方法 | ||
1.一种分离核酸的方法,包括:
a)使包含核酸的样品与包含大于35%体积的乙醇的缓冲液接触;和
b)从所述样品分离所述核酸。
2.权利要求1的方法,其中所述乙醇以约40%-60%的浓度存在于所述缓冲液中。
3.权利要求1的方法,其中所述乙醇以约45%-55%的浓度存在于所述缓冲液中。
4.权利要求1的方法,其中所述乙醇以约50%的浓度存在于所述缓冲液中。
5.权利要求1的方法,其中所述分离所述核酸包括步骤i)使所述核酸与固体载体结合;ii)用洗涤缓冲液洗涤所述固体载体;和iii)从所述固体载体洗脱所述核酸。
6.权利要求1-5中任一项的方法,其中所述核酸为循环DNA。
7.权利要求6的方法,其中所述DNA长度小于1000个碱基。
8.权利要求6的方法,其中所述DNA长度小于500个碱基。
9.权利要求6的方法,其中所述DNA长度小于200个碱基。
10.权利要求1-8中任一项的方法,其中所述样品选自血液、血液制品、血清和尿液。
11.权利要求9的方法,其中所述血液制品为血浆。
12.权利要求1-11中任一项的方法,其中所述样品来自受试者并且所述样品中所述核酸的存在情况指示所述受试者的疾病状态。
13.权利要求12的方法,其中所述疾病状态为癌症。
14.权利要求1-13中任一项的方法,进一步包括分析所述样品中所述核酸的存在情况的步骤。
15.权利要求14的方法,其中所述分析包括进行选自扩增测定、杂交测定、甲基化状态检测测定和测序测定的核酸检测测定。
16.权利要求15的方法,其中所述扩增测定为实时PCR。
17.权利要求15的方法,其中所述甲基化状态检测测定为甲基化特异性PCR或heavymethylPCR。
18.一种试剂盒,包含:
a)包含35%或以上体积的乙醇的缓冲液;
b)洗涤缓冲液;
c)固体载体;
d)洗脱缓冲液。
19.权利要求18的试剂盒,其中所述乙醇以约40-60%的浓度存在于所述缓冲液中。
20.权利要求18的试剂盒,其中所述乙醇以约45-55%的浓度存在于所述缓冲液中。
21.权利要求18的试剂盒,其中所述乙醇以约50%的浓度存在于所述缓冲液中。
22.权利要求18的试剂盒,其中所述固体载体选自树脂、柱、颗粒和小珠。
23.权利要求18的试剂盒,其中所述试剂盒进一步包含用于核酸分析的试剂。
24.权利要求23的试剂盒,其中所述分析选自测序、扩增、杂交和甲基化特异性检测。
25.权利要求24的试剂盒,其中所述试剂选自一个或多个测序引物、检测试剂、缓冲液、一个或多个核酸探针、一个或多个扩增引物、核酸聚合酶、脱氧核苷酸、亚硫酸氢盐、甲基化特异性阻断探针和一个或多个甲基化特异性扩增引物。
26.一种组合物,包含:循环DNA;和包含35%或以上体积的乙醇的缓冲液。
27.权利要求26的组合物,其中所述核酸与固体载体结合。
28.权利要求26的组合物,其中所述乙醇以约40%-60%的浓度存在于所述缓冲液中。
29.权利要求26的组合物,其中所述乙醇以约45%-55%的浓度存在于所述缓冲液中。
30.权利要求26的组合物,其中所述乙醇以约50%的浓度存在于所述缓冲液中。
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