[发明专利]变体因子VIII多肽及其产生和使用方法

权利要求书

1.一种因子VIII多肽的变体，其中所述因子VIII多肽是包含氨基酸位置370-375处的凝血酶切割位点和氨基酸位置558-565处的活化环的功能性因子VIII，其中所述氨基酸位置编号依照SEQIDNO:1中列出的氨基酸序列；且其中所述变体包含在所述凝血酶切割位点内一个或多个残基处的氨基酸取代和在所述活化环内一个或多个残基处的氨基酸取代。

2.权利要求1的变体，其中所述凝血酶切割位点内的所述取代不包括在氨基酸位置372处的取代。

3.权利要求1或2的变体，其中所述因子VIII多肽还包含包括氨基酸残基E272和D519的A1-A2域界面和包括氨基酸残基E665和E1984的A2-A3域界面，其中所述氨基酸位置编号依照SEQIDNO:1中列出的氨基酸序列；且其中所述变体还包含在所述A1-A2域界面的一个或多个氨基酸残基处的取代和在所述A2-A3域界面的一个或多个氨基酸残基处的取代。

4.权利要求1-3中任一项的变体，其中所述凝血酶切割位点内的所述取代包含在选自下组的一个或多个位置处的取代：370、371和374。

5.权利要求1-3中任一项的变体，其中所述凝血酶切割位点内的所述取代包含在选自下组的两个或更多个位置处的取代：370、371和374。

6.权利要求1-5中任一项的变体，其中所述活化环内的所述取代包含在选自下组的一个或多个位置处的取代：559、562和565。

7.权利要求1-5中任一项的变体，其中所述活化环内的所述取代包含在选自下组的两个或多个位置处的取代：559、562和565。

8.权利要求3-7中任一项的变体，其中对所述A1-A2域界面的所述取代包含选自下组的一个或多个取代：E272A、E272V、D519A和D519V。

9.权利要求3-8中任一项的变体，其中对所述A2-A3域界面的所述取代包含选自下组的一个或多个取代：E665A、E665V、E1984A和E1984V。

10.权利要求3-7中任一项的变体，其中对所述A1-A2域界面的所述取代包含D519V且其中对所述A2-A3域界面的所述取代包含E665V。

11.权利要求1-10中任一项的变体，其中所述变体包含在选自由370、371和374组成的组的一个或多个位置处的氨基酸取代和在选自由559、562和565组成的组的一个或多个位置处的氨基酸取代。

12.权利要求1-10中任一项的变体，其中所述变体包含在选自由370、371和374组成的组的两个或更多个位置处的氨基酸取代和在选自由559、562和565组成的组的两个或更多个位置处的氨基酸取代。

13.权利要求1-12中任一项的变体，其中所述氨基酸取代选自下组：Q370M，I371P，V374F，V559L，R562W，R562F，R562K和Q565E。

14.权利要求1-12中任一项的变体，其中所述变体包含在所述凝血酶切割位点内的氨基酸取代，其选自下组：

(i)Q370M和I371P，和

(ii)I371P和V374F；

且包含在所述活化环内的氨基酸取代，其选自下组：

(i)V559L和R562F，

(ii)V559L和R562W，

(iii)V559L和Q565E，

(iv)V559L，R562W和Q565E，和

(v)V559L，R562F和Q565E。

15.权利要求1-10中任一项的变体，其中所述变体包含氨基酸取代I371P，V374F，V559L，R562W和Q565E。

16.权利要求1-10中任一项的变体，其中所述变体包含氨基酸取代I371P，V374F，V559L，R562W，Q565E，D519V和E665V。

17.权利要求1-16中任一项的变体，其中所述变体还包含在氨基酸位置336处的氨基酸取代。

18.权利要求17的变体，其中所述在氨基酸位置336处的氨基酸取代包括R336I取代。