[发明专利]免疫保护性原代间充质干细胞和方法

说明书

本文描述了免疫保护性原代间充质干细胞（IP‑MSC），其附加型表达多重免疫反应性多肽，其特异性靶向病原体（例如病毒、细菌或寄生虫的传染性物种）或毒素。IP‑MSC表达两种或更多种（例如2至约100种）免疫反应性多肽（例如全长抗体、单链抗体（ScFV）、Fab或F（ab'）₂抗体片段、双抗体、三抗体等等），以及任选地，一种或多种其他免疫调节性多肽，例如细胞因子例如白细胞介素（例如IL‑2、IL‑4、IL‑6、IL‑7、IL‑9和IL‑12）、干扰素（例如IFNα、IFNβ或IFNω）等等，其可以增强免疫反应性多肽的有效性。

发明领域

本发明涉及间充质干细胞。更具体而言，本发明涉及用于递送多肽的原代间充质干细胞（MSC），所述多肽针对病理因子例如病原体和毒素，以及用于制备此类MSC和针对病理因子采用此类MSC的方法。

序列表并入

关于本申请的生物学序列信息包括在引入本文作为参考的ASCII文本文件中，所述ASCII文本文件具有文件名TU-491-SEQ.txt，于2013年3月11日创建，并且具有12,954字节的文件大小。

背景

间充质干细胞（MSC）是独特的多潜能祖细胞，其目前用作用于各种状况包括癌症和自身免疫疾病的基因治疗载体。尽管MSC主要因在同种异体MSC移植期间的抗炎特性已知，但存在MSC实际上可以促进某些背景下的适应性免疫的证据。MSC已在广泛多样的组织中得到鉴定，所述组织包括骨髓、脂肪组织、胎盘和脐带血。脂肪组织是MSC的最丰富的已知来源之一。

MSC已在各种临床和临床前背景下成功地移植到同种异体宿主内。这些供体MSC通常促进免疫耐受，包括移植物抗宿主病（GvHD）的抑制，所述GvHD可以在来自主要组织相容性复合物（MHC）错配供体的细胞或组织移植后发展。在MSC移植后缩减的GvHD症状是由于T和B细胞增殖、静止天然杀伤细胞的细胞毒性，和树突状细胞（DC）成熟的直接MSC抑制。至少一项研究已报道针对移植的同种异体MSC的抗体的生成。然而，预防GvHD的能力也提示在仅针对由MSC表达的外来抗原而不是特异性针对供体MSC的选择性诱导免疫应答中，表达外来抗原的MSC在细胞疫苗接种期间可能具有超过其他细胞类型（即DC）的优点。

经修饰的MSC的使用还已在体内进行探究，以便增强MSC的免疫调节特性。经转导为过度生产IL-10的MSC压制小鼠模型中的胶原诱发性关节炎（Choi等人，2008）。另外，移植到阿尔茨海默氏病小鼠模型内的表达胰高血糖素样肽-1的MSC导致脑中的A-β沉积的减少（Klinge等人，2011）。在骨质减少的小鼠模型中，具有骨形态发生蛋白的稳定过表达的接受经转导的MSC的小鼠具有增加的骨密度（Kumar等人，2010）。在脊髓损伤的大鼠模型中，稳定过表达脑源性神经营养因子的用MSC治疗的大鼠具有比施用单独的MSC更好的总体结果（Sasaki等人，2009）。最近，在膀胱出口梗阻的大鼠模型中，具有肝细胞生长因子的稳定过表达的接受经转导的MSC的大鼠在膀胱中具有减少的胶原累积（Song等人，2012）。这些研究指示经修饰的MSC是用于蛋白质表达和递送的有用和可行的媒介物，以靶向各种疾病和组织。