[发明专利]用于进行多路测定法的改进方法

权利要求书

1.一种对多种目标分析物进行多路结合测定法的方法，所述方法包括

(a) 在一个或多个步骤中，将下列成分混合：

(i) 包含第一目标分析物和第二目标分析物的样品，

(ii) 固定在第一结合域上的第一靶向剂，所述第一靶向剂是寡核苷酸，

(iii) 与连接剂连接的第一靶向剂互补物，其中所述第一靶向剂互补物是第一靶向剂的结合配偶体，所述第一靶向剂互补物是寡核苷酸，

(iv) 与补充连接剂连接的第一结合试剂，其中所述第一结合试剂是第一分析物的结合配偶体，

(v) 固定在第二结合域上的第二靶向剂，所述第二靶向剂是寡核苷酸，

(vi) 与连接剂连接的第二靶向剂互补物，其中所述第二靶向剂互补物是第二靶向剂的结合配偶体，所述第二靶向剂互补物是寡核苷酸，

(vii) 与补充连接剂连接的第二结合试剂，其中所述第二结合试剂是第二分析物的结合配偶体，和

(viii) 任选至少两份的桥接剂，

其中，

如果桥接剂省略，则各连接剂是补充连接剂的结合配偶体，或

如果包括桥接剂，则桥接剂具有用于连接剂之一的第一结合部位和用于补充连接剂之一的其它结合部位；

(b) 形成

(i) 在第一结合域上的包含第一靶向剂、第一靶向剂互补物、第一结合试剂和第一分析物的第一结合复合物，和

(ii) 在第二结合域上的包含第二靶向剂、第二靶向剂互补物、第二结合试剂和第二分析物的第二结合复合物，和

(c) 分别测量第一和第二结合域上的第一和第二分析物的量，其中在步骤(a)中混合的成分还包含结合所述第一分析物的第一检测试剂和结合所述第二分析物的第二检测试剂，步骤(b)中形成的所述第一和第二复合物还分别包含所述第一和第二检测试剂，并且其中所述测量步骤还包括通过电化学发光测量所述第一和第二检测试剂的存在情况，

其中所述连接剂包含生物素、链霉抗生物素、抗生物素蛋白、氨基、硫醇基、醛基、酰肼基、叠氮基、炔基、马来酰亚胺基或碘乙酰胺基，

其中如果桥接剂省略，则(a)连接剂是生物素，而补充连接剂是链霉抗生物素或抗生物素蛋白；(b)连接剂是链霉抗生物素或抗生物素蛋白，而补充连接剂是生物素；(c)连接剂是肽，而补充连接剂是抗肽抗体；或(d)连接剂是抗肽抗体，而补充连接剂是肽，或者如果包括桥接剂，则桥接剂是链霉抗生物素或抗生物素蛋白，而连接剂和补充连接剂各自是生物素，

并且其中所述第一检测试剂包含第一可检测标记，所述第一检测试剂是抗体，所述第二检测试剂包含第二可检测标记，所述第二检测试剂是抗体。

2.权利要求1所述的方法，其中所述样品含有一种或多种其它的目标分析物，对于各种其它的目标分析物，混合步骤(a)还包括

在一个或多个步骤中，将(ix)固定在其它结合域上的其它靶向剂、与连接剂连接的其它靶向剂互补物和与补充连接剂连接的其它结合试剂和(x)在所述其它结合域上的包含所述其它靶向剂、所述其它靶向剂互补物、所述其它结合试剂和其它分析物的其它结合复合物混合；

所述形成步骤(b)还包括形成(iii)在所述其它结合域上的包含所述其它靶向剂、所述其它靶向剂互补物、所述其它结合试剂和所述其它分析物的其它结合复合物；和

步骤(c)中的测量还包括测量所述其它结合域上的所述其它分析物的量。

3.权利要求1所述的方法，其中

所述第一靶向剂互补物和所述第一结合试剂作为预先结合的第一靶向复合物提供，所述第一靶向复合物包含通过连接剂和补充连接剂之间的结合相互作用连接的第一靶向剂互补物和第一结合试剂；和

所述第二靶向剂互补物和所述第二结合试剂作为预先结合的第二靶向复合物提供，所述第二靶向复合物包含通过连接剂和补充连接剂之间的结合相互作用连接的第二靶向剂互补物和第二结合试剂。

4.权利要求3所述的方法，其中

提供与固定在第一结合域上的第一靶向剂预先结合的第一靶向复合物；和

提供与固定在第二结合域上的第二靶向剂预先结合的第二靶向复合物。