[发明专利]靶向真菌细胞壁多糖的抗体

说明书

公开了一种包含一个或多个多糖部分的化合物，所述多糖部分各自独立地由式β(1→4)‑[GlcNH‑R]_n‑2,5‑脱水甘露糖表示，其中n是3～500的正整数，并且R是H或酰基。所述化合物可以通过下述过程制造：(a)使壳聚糖与足以将所述壳聚糖部分地N‑酰化的酰化剂反应，产生改性甲壳素/壳聚糖混合聚合物；和(b)使所述改性甲壳素/壳聚糖混合聚合物与脱氨基剂反应以在未酰化的壳聚糖部分处切割所述混合聚合物。所述化合物可用于进行针对真菌感染的免疫。还公开了对所述化合物具有特异性的抗体、此类抗体在针对真菌感染进行保护中的应用。

背景技术

近年来侵袭性真菌疾病发病率的显著上升，以及出现药物抗性和之前罕见的真菌物种，突出了对于广谱有效的新型治疗和预防性抗真菌治疗策略的需要(3-5)。侵袭性真菌感染的发病率增加可部分归因于免疫受损的患者群体的增多，原因是与获得性免疫缺陷有关的疾病的患者、重症护理病房中的患者、进行手术或免疫抑制性治疗的患者和接受器官或细胞移植治疗的患者的数量不断增长。重要的是，使个体易患侵袭性真菌疾病的风险因素不排除增强有效的免疫响应和有利地响应免疫治疗的可能性(6,7)，承诺开发有效的基于疫苗或免疫治疗的途径来满足该未被满足的医学需要。

影响人类的两种最普遍的病原性真菌-曲霉菌和念珠菌属-占所有健康护理获得性感染的约8-10％，造成的死亡率为30-40％(5,8)。念珠菌物种是美国医院感染败血症的第四大原因，由所有病原性真菌导致的侵袭性真菌疾病的发病率上升带来了全世界的显著护理负担。由于医院获得性真菌感染的停留和治疗长度增加造成的过度护理成本仅在美国即为每年10亿美元。此外，临床分离物的综合抗真菌易感性测试明显得出，即使安全有效的抗真菌药物取得进展，但是对所有类别的当前可获得的抗真菌剂具有抗性菌株的出现(5)。隐球菌性脑膜炎是被隐球菌属真菌感染，也称为隐球菌病，在晚期HIV/AIDS人群中是非常严重的机会性感染。隐球菌病不具有传染性，意味着其不会人-人传播。隐球菌性脑膜炎特别是在隐球菌从肺扩散到脑后发生。作为世界上的全球问题，每年发生约1000000例隐球菌性脑膜炎新病例，导致625,000例死亡。许多病例是机会性感染，其出现在具有HIV/AIDS的人中。虽然在发达国家可广泛获得的抗逆转录病毒治疗(ART)有助于在这些地区减少隐球菌感染，但在获得护理受限的发展中国家这仍然是主要问题。例如在整个撒哈拉以南非洲的大多数地区，隐球菌属现在是成人脑膜炎的最常见原因。隐球菌性脑膜炎是HIV/AIDS患者中前列原因之一，在撒哈拉以南非洲，其可能每年导致与肺结核一样多的人死亡(24)。

抗击真菌疾病的这些重大挑战在于迫切需要高度有效的泛真菌疫苗作为抗真菌武器库的有价值组分。迄今为止，已经开发出两种真菌细胞壁糖组分，β-甘露聚糖和β-葡聚糖，作为用于抗真菌接种的靶标。由线性β-(1→3)-葡聚糖或β-(1→2)-甘露三糖组成的结合疫苗已经显示赋予针对真菌疾病的保护性，在主动和被动性免疫中均具有功效(9-11)。在真菌疾病的动物模型中，β-葡聚糖疫苗证明针对白色念珠菌(C.albicans)、烟曲霉(A.fumigatus)和新型隐球菌(C.neoformans)有效，证实可以针对多种不同的真菌病原体进行成功接种(9,12)。然而，产生有效的疫苗响应需要仔细考虑靶抗原的精细结构，有确凿证据表明真菌病原体使用的一种免疫逃避机制是表达诱导非保护性或抑制性抗体响应的免疫显性表位。这些诱饵表位消除了针对保护性表位的响应的有效性。例如，由线性β-(1→3)-葡聚糖表位组成的疫苗产生保护性响应，而由具有β-(1→6)-葡聚糖枝化物的β-(1→3)-葡聚糖组成的疫苗产生针对两种结构的抗体，但不赋予针对真菌疾病的保护性(13,14)。

另外，疫苗的基础有用性依赖于靶抗原的通用性。例如，β-(1→2)甘露三糖表位不在所有念珠菌属物种中出现，并且使用该表位的疫苗抗原依赖于保护性肽表位以扩展其应用(10)。考虑到一些细胞壁糖表位的有限分布，并且从真菌病原体逃避针对细胞壁组分产生的免疫响应所使用的机制出发，需要广泛有效的真菌疫苗。本发明设计为靶向高度保守的真菌细胞壁糖表位以提供泛真菌疫苗(pan-fungal vaccine)。