[发明专利]采用磺酰脲类依赖型稳定化结构域的方法和组合物

权利要求书

1.一种多核苷酸构建体，其包含编码具有磺酰脲类(SU)依赖型稳定化 结构域的多肽的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸构建体，其中所述SU依赖型稳定化 结构域包含

(a)具有至少一个去稳定化突变的SU化学调节转录调节因子的配 体结合结构域；

(b)具有至少一个去稳定化突变的SU化学调节转录调节因子的 DNA结合结构域；或

(c)所述SU依赖型稳定化结构域包含(a)和(b)两者。

3.根据权利要求1或2所述的多核苷酸构建体，其中所述SU化学调节 转录调节因子的所述配体结合结构域包含多肽，所述多肽与如SEQ IDNO：3-419中任一项所示的氨基酸序列的配体结合结构域具有至少 80％、85％、90％或95％的序列同一性，其中所述多肽还包含至少一 个去稳定化突变。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的多核苷酸构建体，其中具有所 述SU依赖型稳定化结构域的所述编码的多肽包含SU化学调节转录 调节因子。

5.根据权利要求4所述的多核苷酸构建体，其中所述SU化学调节转录 调节因子包含反向SU化学调节的转录阻遏物(revSuR)。

6.根据权利要求4所述的多核苷酸构建体，其中所述SuR与如SEQID NO：3-411中所示的任一多肽具有至少80％、85％、90％或95％的序 列同一性，其中所述多肽还包含至少一个去稳定化突变。

7.根据权利要求5所述的多核苷酸构建体，其中所述revSuR与如SEQ IDNO：412-419中任一项所示的任一多肽具有至少80％、85％、90％ 或95％的序列同一性，其中所述多肽还包含至少一个去稳定化突 变。

8.根据权利要求5或7所述的多核苷酸构建体，其中所述revSuR还包 含转录激活因子。

9.根据权利要求2至7中任一项所述的多核苷酸构建体，其中所述去 稳定化突变包括L17G突变、G96R突变，或它们的任意组合。

10.根据权利要求8所述的多核苷酸构建体，其中所述去稳定化突变包 括所述L17G突变、所述G96R突变，或它们的任意组合。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的多核苷酸构建体，其中编码所 述具有SU依赖型稳定化结构域的多肽的所述核苷酸序列有效连接至 编码所关注多肽的多核苷酸。

12.根据权利要求11所述的多核苷酸构建体，还包含编码内含肽的核苷 酸序列。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的多核苷酸构建体，其中所述 SU包含嘧啶基磺酰脲类化合物、三嗪基磺酰脲类化合物、噻二唑基 脲类化合物、氯磺隆、胺苯磺隆、噻吩磺隆、甲磺隆、甲嘧磺隆、 苯磺隆、氯嘧磺隆、烟嘧磺隆或砜嘧磺隆化合物。

14.一种包含根据权利要求1至13中任一项所述的多核苷酸构建体的 DNA构建体，其中所述多核苷酸有效连接至启动子。

15.根据权利要求14所述的DNA构建体，其中所述启动子是包含至少 一个、两个或三个用于所述所编码的SU化学调节转录调节因子的同 源操纵基因的配体响应启动子。

16.根据权利要求15所述的DNA构建体，其中所述同源操纵基因包括 tet操纵基因。

17.根据权利要求14所述的DNA构建体，其中所述启动子是组成型启 动子、组织特异性启动子或诱导型启动子。

18.一种细胞，其具有根据权利要求1至14中任一项所述的重组多核苷 酸或根据权利要求15至17中任一项所述的DNA构建体。

19.根据权利要求18所述的细胞，其中所述细胞为植物细胞。

20.根据权利要求19所述的植物细胞，其中所述植物细胞来自单子叶植 物或双子叶植物。