[发明专利]生长-诱导-生产阶段的控制

权利要求书

1.一种由碳源产生化学产品的方法，所述方法包括通过采用生物生产过程来产生所述化学产品，所述生物生产过程包括受控的多阶段生产过程。

2.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生产过程的一个或多个阶段的引发或结束通过对产生所述化学产品的生物体进行遗传修饰来控制。

3.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生产过程的一个或多个阶段的引发或结束通过对细胞环境作出改变来控制。

4.一种由可再生碳源产生化学产品的生物生产方法，所述方法包括利用经遗传修饰的生物体将所述碳源转化为所述化学产品，其中所述转化为受控的多阶段生产过程，其中所述生产过程的一个或多个阶段的引发和/或结束通过对所述生物体进行遗传修饰来控制，并且/或者通过对所述生物体的环境作出改变来控制。

5.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生物生产过程包括如下阶段中的两者或更多者：(1)生长阶段，(2)诱导阶段，(3)生产阶段。

6.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生长阶段和所述诱导阶段在约25℃至约35℃的温度下进行。

7.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生产阶段在约35℃至约45℃的温度下进行。

8.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生产阶段温度高于所述诱导阶段温度。

9.根据任一项权利要求所述的方法，其中在约1至约5小时的时间内发生所述生产阶段之间温度的升高。

10.根据任一项权利要求所述的方法，其中在所述生长阶段期间，所述生物体自我复制，并累积产生所述化学产品所需的生物催化剂。

11.根据任一项权利要求所述的方法，其中在所述诱导阶段期间，诱导对于所述化学品的产生至关重要的关键酶的表达，并且所述酶积聚，而执行产生所述化学产品所需的反应。

12.根据任一项权利要求所述的方法，其中在所述生产阶段期间，所述生物体产生所述化学产品。

13.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生长阶段取决于将引发生长的关键外来反应物的存在，并且所述生长阶段的引发和结束通过加入组合物中的起始反应物的添加和量来控制，所述组合物包含所述碳源和所述生物体。

14.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述化学产品为3-HP，所述生物体为大肠杆菌，并且所述关键外来反应物为磷酸盐。

15.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述生长阶段通过将磷酸盐加入包含所述碳源和所述生物体的所述组合物中来引发，并且所述生长阶段的持续时间通过加入的磷酸盐的量来控制。

16.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述诱导阶段通过对所述生物体进行遗传修饰来控制。

17.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述遗传修饰包括编码生物合成途径中用于将所述碳源转化为所述化学产品的酶的基因的编码表达，其中使用通过磷酸盐耗尽而活化的启动子将所述基因编码到所述生物体中。

18.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述化学产品为3-HP，所述生物体为大肠杆菌，并且所述基因选自：mcr、mmsB、ydfG、rutE、nemA、NDSD、编码ACCase的单独或融合亚基的基因、和/或它们的任何组合。

19.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述化学产品为3-HP，所述生物体为大肠杆菌，并且所述启动子选自：引导选自如下的大肠杆菌基因的表达的启动子：amn、tktB、xasA、yibD、ytfK、pstS、phoH、phnC、其他磷酸盐调控基因、和/或它们的任何组合。

20.根据任一项权利要求所述的方法，其中所述化学产品为3-HP，并且所述生物体为大肠杆菌，所述基因选自：mcr、mmsB、ydfG、rutE、nemA、NDSD、编码ACCase的单独或融合亚基的基因和/或它们的任何组合；并且所述启动子选自：引导选自如下的大肠杆菌基因的表达的启动子：amn、tktB、xasA、yibD、ytfK、pstS、phoH、phnC和其他磷酸盐调控基因、和/或它们的任何组合。