[发明专利]磷酸转酮酶和磷酸转乙酰酶生产乙酰-辅酶A衍生化合物的用途有效
| 申请号： | 201480025977.7 | 申请日： | 2014-03-14 |
| 公开（公告）号： | CN105189772B | 公开（公告）日： | 2019-09-13 |
| 发明（设计）人： | 克里斯蒂·米歇尔·霍金斯;蒂娜·提帕万·马哈特徳伊库勒-梅多斯;亚当·利昂·梅多斯;劳伦·芭芭拉·皮肯斯;安娜·戴;安妮·宁·聪 | 申请（专利权）人： | 阿迈瑞斯公司;道达尔市场服务公司 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京市磐华律师事务所 11336 | 代理人： | 董巍;谢栒 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 磷酸 转酮酶 乙酰 生产 辅酶 衍生 化合物 用途 | ||
1.经遗传修饰的宿主细胞，包括：
(a)编码磷酸转酮酶(PK；EC4.1.2.9)的异源核酸；
(b)编码磷酸转乙酰酶(PTA；EC2.3.1.8)的异源核酸；和
(c)内源甘油-1-磷酸酶(EC3.1.3.21)的功能性破坏，所述酶将乙酰磷酸转换为乙酸根离子；其中从乙酰磷酸到乙酸根离子的转换被功能性破坏。
2.根据权利要求1所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述甘油-1-磷酸酶选自GPP1/RHR2和GPP2/HOR2。
3.根据权利要求2所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，GPP1/RHR2被功能性破坏。
4.根据权利要求2所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，GPP2/HOR2被功能性破坏。
5.根据权利要求2所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，
·GPP1/RHR2，和
·GPP2/HOR2的两者，被功能性破坏。
6.根据权利要求1所述的经遗传修饰的宿主细胞，所述经遗传修饰的宿主细胞进一步包括编码酰化乙醛脱氢酶(ADA；EC1.2.1.10)的异源核酸。
7.根据权利要求6所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述经遗传修饰的宿主细胞能够产生类异戊二烯。
8.根据权利要求7所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述经遗传修饰的宿主细胞包含一种或多种异源核酸，所述一种或多种异源核酸编码用于制备异戊烯焦磷酸的甲羟戊酸(MEV)途径中的一种或多种酶。
9.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括利用NADH的HMG-CoA还原酶。
10.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括使两分子乙酰辅酶A缩合形成乙酰乙酰辅酶A的酶。
11.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括使乙酰乙酰辅酶A与乙酰辅酶A缩合形成HMG-CoA的酶。
12.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括将HMG-CoA转换为甲羟戊酸的酶。
13.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括使得甲羟戊酸磷酸化为5-磷酸甲羟戊酸的酶。
14.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括将5-磷酸甲羟戊酸转换为5-焦磷酸甲羟戊酸的酶。
15.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶包括将5-焦磷酸甲羟戊酸转换为异戊烯焦磷酸的酶。
16.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述MEV途径中的一种或多种酶选自HMG-CoA合成酶、甲羟戊酸激酶、磷酸甲羟戊酸激酶和甲羟戊酸焦磷酸脱羧酶。
17.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，所述宿主细胞包含编码MEV途径中的全部酶的多种异源核酸。
18.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞，其中，编码MEV途径中的一种或多种酶的所述一种或多种异源核酸在单一转录调节因子的控制下。
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